HR Assay Kit (Spectrophotometry)

硫酸铁铵中的Fe³⁺可将羟胺氧化为氮气，自身被还原为Fe²⁺，Fe²⁺在弱酸条件下与邻菲罗琳形成橙红色配合物，在510nm处有吸收峰，羟胺还原酶作用于羟胺，使配合物形成量减少，510nm处吸光值的减少可反映羟胺还原酶的活性。

50T/24S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、天平、常温离心机、震荡仪、氮吹仪。

二、样本处理
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至510nm，蒸馏水调零。
2.样本测定，（在EP 管中依次加入下列试剂）：

四、计算公式：
标准曲线：y = 0.185x -0.1828，R² = 0.9992
酶活定义：每克土壤每天转化1μg羟胺为一个酶活力单位。
HR活性 (μg/d /g土样) = (ΔA+ 0.1828)÷0.185×V反总÷W÷T = 181.62×(ΔA+0.1828)÷W
注：V反总：加入提取液体积，1.4mL；W：样本质量，g；T：1/24h。

1.土壤表层溶解氧浓度较大，取样应取表层5cm以下的土壤，否则酶活性较低或者测定不到。
2.CB0268S-C尽量不要敞口放置，取完立即加盖拧紧。
3.反应体系最好能用氮吹仪排除溶解氧，若无此装置，则加入试剂三后立即密封，于30℃反应1h。
4.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。