FFA 与铜离子结合形成脂肪酸铜盐，并溶于氯仿；利用铜试剂法测定铜离子含量，即可推算出游离脂肪酸含量。

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、一个 50mL 玻璃瓶、一个 10 mL 玻璃瓶、正庚烷、无水甲醇、氯仿（三氯甲烷）、无水乙醇和蒸馏水。

二、样品中 FFA 提取：
1.血清中 FFA测定：血清样本置于-20℃冰箱保存，待测。
2.组织中 FFA 含量测定：组织用生理盐水冲洗干净后，用吸水纸吸取表面水分，称取约 0.1g，加 入1.0 mL CB0080S-A，匀浆后，8000rpm，4℃离心 10min，取上清液，待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 550 nm，无水乙醇调零。
2.CB0080S-C在 37℃水浴中预热 30 min 以上。
3.标准品的稀释：将标准品用氯仿稀释成 1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。
4.在1.5mL 离心管中依次加入下列试剂：

注意：对照管和空白管各只做一管。

四、FFA 活力单位的计算：
1.标准曲线的绘制：
以标准溶液的浓度为 x 轴，以ΔA标准 (ΔA=A标准管-A空白管) 为 y 轴，绘制标准曲线，得 到方程 y=kx+b。将ΔA(ΔA=A测定管-A对照管)带入方程得到 x。
2.血清中 FFA 含量计算
FFA (μmol/L) = 1000x
3.组织中 FFA 含量计算
(1)按样本蛋白浓度计算
FFA 含量 (μmol/mg prot) = x×V样总÷(Cpr×V样总) = x÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
FFA (μmol/g 鲜重) = x×V样总÷W
注： V样总：上清液总体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品鲜重，g。1000：单位换算系数，1L=1000mL。

1.CB0080S-D配制应尽量晚配，可在操作到加入CB0080S-C时，再进行配制。
2.必须保证每管的震荡频率及时间一致。
3.尽量在 30min 内完成测定，并且测完后要密封好再丢弃。
4.因所用试剂多数为有机溶剂，同一支吸头多次吸取会造成体积不准确，建议更换吸头。
5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。