Free Aliphatic Acid Assay Kit (Microanalysis)

Name: Free Aliphatic Acid Assay Kit (Microanalysis)
Brand: TargetMol
SKU: CB0080M
Rating: 5 (4 reviews)

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产品编号 CB0080M

别名 游离脂肪酸含量检测试剂盒（微量法）

游离脂肪酸（Free Aliphatic Acid, free fatty acid, FFA）既是脂肪水解的产物，又是脂肪合成的底物。FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关，也可反映食物贮藏中的品质变化。

规格	价格	库存	数量
100 T	¥ 858	4-6日内发货

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实验操作小课堂

常见问题解答

检测原理

FFA 与铜离子结合形成脂肪酸铜盐，并溶于氯仿；利用铜试剂法测定铜离子含量，即可推算出游离脂肪酸含量。

产品规格

100T/96S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0080M-A	100mL×1 瓶	4℃保存；
CB0080M-B	10mL×1瓶（自备）	实验前一天配制，在玻璃瓶中按照正庚烷：无水甲醇：氯仿=24:1:25 的比例配置（自备），盖紧后混匀，室温保存。
CB0080M-C	4mL×1 瓶	4℃保存；
CB0080M-D	粉剂×2 瓶	4℃保存。临用前在试剂瓶中加入 13mL 无水乙醇，充分溶解，4℃可保存一周。
CB0080M-Standard	粉剂×1 瓶	室温保存。临用前把试剂转移到10ml玻璃瓶中，加入 7.8 mL 氯仿充分溶解，即为 5μmol/mL 的棕榈酸标准溶液。

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
研钵、冰、台式离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、两个10ml玻璃瓶、正庚烷、无水甲醇、氯仿（三氯甲烷）、无水乙醇和蒸馏水。

二、样品中 FFA 提取：
1.血清中 FFA测定：血清样本置于-20℃冰箱保存，待测。
2.组织中 FFA 含量测定：组织用生理盐水冲洗干净后，用吸水纸吸取表面水分，称取约 0.1g，加入1.0 mL CB0080M-A，匀浆后，8000rpm，4℃离心 10min，取上清液，待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长到 550 nm，蒸馏水调零。
2.CB0080M-C在 37℃水浴中预热 30 min 以上。
3.标准品的稀释：将标准品用氯仿稀释成 1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05μmol/mL。
4.在1.5mL 离心管中依次加入下列试剂：

试剂名称	对照管（µL）	测定管（µL）	空白管（µL）	标准管（µL）
蒸馏水	10
样本		10
氯仿			10
标准品				10
CB0080M-B	100	100	100	100
CB0080M-C	40	40	40	40
充分振荡 10min 后，3000rpm，离心 10min，取上层溶液 50μL
上层溶液	50	50	50	50
CB0080M-D	200	200	200	200
充分振荡 2min 后，静置 15min，取 0.2mL 于微量比色皿/96 孔板，550 nm 下测吸光值，分别记为 A对照管、A测定管、A空白管、A标准管。

注意：对照管和空白管各只做一管。

四、FFA 活力单位的计算：
1.标准曲线的绘制：
以标准溶液的浓度为 x 轴，以ΔA标准 (ΔA=A标准管-A空白管) 为 y 轴，绘制标准曲线，得到方程 y=kx+b。将ΔA(ΔA=A测定管-A对照管)带入方程得到 x。
2.血清中 FFA 含量计算
FFA (μmol/L) = 1000x
3.组织中 FFA 含量计算
(1)按样本蛋白浓度计算
FFA 含量 (μmol/mg prot) = x×V样总÷(Cpr×V样总) = x÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
FFA (μmol/g 鲜重) = x×V样总÷W
注： V样总：上清液总体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品鲜重，g。1000：单位换算系数，1L=1000mL。

注意事项

1.CB0080M-D配制应尽量晚配，可在操作到加入CB0080M-C时，再进行配制。
2.必须保证每管的震荡频率及时间一致。
3.尽量在 30min 内完成测定，并且测完后要密封好再丢弃。
4.因所用试剂多数为有机溶剂，同一支吸头多次吸取会造成体积不准确，建议更换吸头。
5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。