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P-DHA Assay Kit (Spectrophotometry)

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货号 CB0067S

别名 脱氢酶活性检测试剂盒(分光光度法)

生物体的脱氧酶(Plant dehydrogenase,PDHA)的活性在很大程度上反映了生物体的活性状态,能直接表示生物细胞对其基质降解能力的强弱。

P-DHA Assay Kit (Spectrophotometry)
其他形式的 “P-DHA Assay Kit (Spectrophotometry)”:

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货号 CB0067S 别名 脱氢酶活性检测试剂盒(分光光度法)

生物体的脱氧酶(Plant dehydrogenase,PDHA)的活性在很大程度上反映了生物体的活性状态,能直接表示生物细胞对其基质降解能力的强弱。

规格价格库存数量
50 T
¥ 748
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

氢受体 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在细胞呼吸过程中接受氢以后,被还原为三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF 呈现红色,在波长 485nm 处有最大吸收峰,采用分光光度法于 485nm 测定其吸光值,即得土壤脱氢酶活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

50T/24S规格的产品组成如下:

组成 规格 储存条件
CB0067S-A 粉剂×1瓶 使用前加 25mL 蒸馏水溶解,尽量现配现用,4℃避光保存
CB0067S-B 75mL×1瓶 4℃保存
CB0067S-C 丙酮 自备
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿(非聚苯乙烯材质)、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、冰、蒸馏水、丙酮(不允许快递,请自备)。

二、样品处理:
称取 0.1g 的植物组织,用蒸馏水清洗 3-4 次,用滤纸吸干水,备用。

三、测定步骤:
1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至485nm,丙酮调零。
2.样本测定:在 EP 管中加入下列试剂:

试剂名称 对照管 (mL) 测定管 (mL)
样品 0.1 g 0.1 g
CB0067S-A 1
CB0067S-B 2 1
充分混匀,37℃,暗培养 3h,取出后立即冰浴 5min,去滤液,尽量用滤纸吸干样本,置于研钵/匀浆器中。
CB0067S-C 1 1
充分研磨(建议在通风橱操作) 后全部移至于离心管中,用少量试剂C冲洗研钵,一起加入离心管,用试剂C容至 2mL,10000 rpm,4℃,离心5min,取1ml上清至玻璃比色皿中,测定 485nm 下的吸光值,计算 ΔA=A 测定-A 对照。

注:每个测定管需设一个对照管。

四、脱氢酶活力计算公式:
1.用微量玻璃比色皿测定的计算公式如下

酶活单位定义:在37℃时,每克样品每小时使每ml反应体系OD值每增加0.01为一个酶活单位。
脱氢酶活性(U/g)=ΔA÷0.01÷T÷W=333.3×ΔA

2.用96孔板测定的计算公式如下

酶活单位定义:在 37℃时,每克样品每小时使每ml反应体系OD值每增加0.005为一个酶活单位。
脱氢酶活性(U/g)=ΔA÷0.005÷T÷W= 666.6×ΔA
注:T:培养时间,3h;W:样品质量,0.1g

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.配制好的CB0067S-A避光保存于4℃,最好在一周内使用,若出现红色,则不能使用。
2.CB0067S-C易挥发,有毒,为了您的健康,请穿实验服,戴口罩,戴乳胶手套操作。
3.反应完成后立即冰浴以终止反应,并去除干净残留的反应液。
4.如果测定出来的吸光值较大,减少样品用量再进行测定; 若吸光值过小则延长培养时间,并注意同步修改计算公式。
5.如果离心后待测的上清依然浑浊,可尝试加大离心转速或延长时间。
6.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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CB0067S - P-DHA Assay Kit (Spectrophotometry) - 说明书-中文.pdf
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