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Dehydroascorbic Acid Assay Kit (Spectrophotometry)

Dehydroascorbic Acid Assay Kit (Spectrophotometry)

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Dehydroascorbic Acid Assay Kit (Spectrophotometry)
产品编号 CB0066S
别名 脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒(分光光度法)
脱氢抗坏血酸 (Dehydroascorbic Acid, DHA) 是氧化形式的抗坏血酸(维生素C, Ascorbic Acid, AsA)。AsA 作为植物细胞一个重要生理指标,其 AsA 的含量、氧化还原状态 (AsA/DHA 比率) 及其合成与代谢相关酶类活性的变化涉及植物对一系列环境胁迫的响应。DHA 是 AsA 的可逆的 氧化型,在生物体内,与抗坏血酸共同组成氧化还原系统,具有电子受体的作用。
规格价格库存数量
50 T
¥ 616
4-6日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

DTT 还原 DHA 生成 AsA,通过测定体系中 AsA 的生成速率,即可计算出 DHA 含量。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

50T/48S规格的产品组成如下:

组成 规格 储存条件
CB0066S-A 50mL×1 瓶 室温保。
CB0066S-B 40mL×1 瓶 室温保存。
CB0066S-C 粉剂×1 瓶 4℃保存。临用前加入10mL 蒸馏水充分溶解,溶液可分装保存于-20℃。
CB0066S-D 粉剂×1 瓶 -20℃保存;临用前加入 5.743 mL 蒸馏水充分溶解;即为 1μmol/mL DHA,溶解后可分装保存于-20℃。
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
紫外分光光度计、1mL石英比色皿、低温离心机、研钵/匀浆器、水浴锅、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
1.样品中 DHA 提取:
2.组织:按照组织质量(g):CB0066S-A体积(mL)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL CB0066S-A)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心 20min,取上清置冰上待测。

三、测定步骤:
1.紫外分光光度计预热 30 min,调节波长到 265nm,蒸馏水调零。
2.CB0066S-B在 25℃水浴锅中预热 30 min。
3.在 1mL 石英比色皿中依次加入:

试剂名称 标准管 (μL) 测定管 (μL)
标准液 100
CB0066S-B 800
CB0066S-C 100
迅速混匀后于 265nm 比色,记录 10s 和 130s 的吸光值 A1 和 A2,△A 空白管=A2-A1。
上清液 100
CB0066S-B 800
CB0066S-C 100
迅速混匀后于 265nm 比色,记录 10s 和 130s 的吸光值 A3 和 A4,△A 测定管=A4-A3。
标准管只需测定 1-2 次。

四、计算公式:
1.按样本蛋白浓度计算

DHA (μmol/mg prot) = C 标准液×(△A 测定管÷△A 标准管)÷Cpr
=△A 测定管÷△A 标准管÷Cpr
2.按样本鲜重计算

DHA (μmol/g) = [C 标准液×△A 测定管÷△A 标准管×V 样总]÷W
=△A 测定管÷△A 标准管÷W
注:C标准液:1μmol/mL;V 样总:上清液总体积,1.0 mL;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量(g)。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.如果ΔA大于1,建议将样本用提取液进行稀释后进行测定,并在公式中乘以稀释倍数。
2.蛋白定量测定,建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。