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Dehydroascorbic Acid Assay Kit (Microanalysis)

Dehydroascorbic Acid Assay Kit (Microanalysis)

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Dehydroascorbic Acid Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0066M
别名 脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒(微量法)
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,123
4-6日内发货
大包装 & 定制
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TargetMol 的所有产品仅用作科学研究或药证申报,不能被用于人体,我们不向个人提供产品和服务。请您遵守承诺用途,不得违反法律法规规定用于任何其他用途。
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

DTT还原DHA生成AsA,通过测定体系中AsA的生成速率,即可计算出DHA含量。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

100T/96S规格的产品组成如下:

组成 规格 储存条件
CB0066M-A 110mL×1瓶 4℃保存。
CB0066M-B 20mL×1瓶 4℃保存。
CB0066M-C 粉剂×1瓶 4℃保存;临用前加入5mL 蒸馏水充分溶解;溶解后可分装保存于-20℃。
CB0066M-D 粉剂×1瓶 -20℃保存。临用前加入 5.743mL 蒸馏水充分溶解;即为1μmol/mL DHA,溶解后可分装保存于-20℃。

注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、低温离心机、研钵/匀浆器、水浴锅、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
二、样品中 DHA 提取:
组织:按照组织质量(g):CB0066M-A体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL CB0066M-A)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心 20min,取上清置冰上待测。
三、测定步骤:

  1. 紫外分光光度计/酶标仪预热 30 min,调节波长到 265 nm,蒸馏水调零。
  2. CB0066M-B在 25℃水浴锅中预热 30 min。
  3. 在微量石英比色皿/96 孔板中依次加入:
试剂名称 标准管 (μL) 测定管 (μL)
标准液 20
CB0066M-B 160
CB0066M-C 20
迅速混匀后于 265nm 比色,记录 10s 和 130s 的吸光值 A1 和 A2,计算△A 空白管=A2-A1。
上清液 20
CB0066M-B 160
CB0066M-C 20
迅速混匀后于 265nm 比色,记录 10s 和 130s 的吸光值 A3 和 A4,计算△A 测定管=A4-A3。

标准管只需测定1-2次。
四、计算公式:

  1. 按样本蛋白浓度计算

DHA (μmol/mg prot) = C 标准液×(△A 测定管÷△A 标准管)÷Cpr
=△A 测定管÷△A 标准管÷Cpr
2. 按样本鲜重计算

DHA (μmol/g) = [C 标准液×△A 测定管÷△A 标准管×V 样总]÷W
=△A 测定管÷△A 标准管÷W
注:C标准液:1μmol/mL;V 样总:上清液总体积,1.0 mL;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量(g)。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

  1. 如果ΔA大于1,建议将样本用提取液进行稀释后进行测定,并在公式中乘以稀释倍数。
  2. 蛋白定量测定,建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
  3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
  4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。