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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
100 T | ¥ 1,123 | 4-6日内发货 |
DTT还原DHA生成AsA,通过测定体系中AsA的生成速率,即可计算出DHA含量。
100T/96S规格的产品组成如下:
组成 | 规格 | 储存条件 |
CB0066M-A | 110mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0066M-B | 20mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0066M-C | 粉剂×1瓶 | 4℃保存;临用前加入5mL 蒸馏水充分溶解;溶解后可分装保存于-20℃。 |
CB0066M-D | 粉剂×1瓶 | -20℃保存。临用前加入 5.743mL 蒸馏水充分溶解;即为1μmol/mL DHA,溶解后可分装保存于-20℃。 |
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、低温离心机、研钵/匀浆器、水浴锅、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
二、样品中 DHA 提取:
组织:按照组织质量(g):CB0066M-A体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL CB0066M-A)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心 20min,取上清置冰上待测。
三、测定步骤:
试剂名称 | 标准管 (μL) | 测定管 (μL) |
标准液 | 20 | |
CB0066M-B | 160 | |
CB0066M-C | 20 | |
迅速混匀后于 265nm 比色,记录 10s 和 130s 的吸光值 A1 和 A2,计算△A 空白管=A2-A1。 | ||
上清液 | 20 | |
CB0066M-B | 160 | |
CB0066M-C | 20 | |
迅速混匀后于 265nm 比色,记录 10s 和 130s 的吸光值 A3 和 A4,计算△A 测定管=A4-A3。 |
注:标准管只需测定1-2次。
四、计算公式:
DHA (μmol/mg prot) = C 标准液×(△A 测定管÷△A 标准管)÷Cpr
=△A 测定管÷△A 标准管÷Cpr
2. 按样本鲜重计算
DHA (μmol/g) = [C 标准液×△A 测定管÷△A 标准管×V 样总]÷W
=△A 测定管÷△A 标准管÷W
注:C标准液:1μmol/mL;V 样总:上清液总体积,1.0 mL;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量(g)。
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