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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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100 T | ¥ 1,274 | 4-6日内发货 |
纤维素为β-葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热能分解成β-葡萄糖,β-葡萄糖在强酸作用下,可脱水生成β-糠醛类化合物,再与蒽酮脱水缩合,生成糠醛衍生物,颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。
100T/96S规格的产品组成如下:
组成 | 规格 | 储存条件 |
CB0046M-A | 100mL×1瓶 | 4℃保存 |
CB0046M-B | 粉剂×2瓶 | 4℃避光保存 |
CB0046M-C | 5mL× 1支 | 4℃保存 |
CB0046M-Standard | 粉剂× 1支 | 4℃保存 |
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、80%乙醇、丙酮、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水等。
二、样本处理:
三、测定步骤:
试剂名称 | 空白管 (μL) | 测定管 (μL) | 标准管 (μL) |
样本 | 150 | ||
蒸馏水 | 150 | ||
标准液 | 150 | ||
工作液 | 35 | 35 | 35 |
浓硫酸 | 315 | 315 | 315 |
混匀,置95度水浴中10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,吸取 200μL 于 96 孔板中或微量玻璃比色皿中测定 620nm 处吸光值 A,分别为 A 测定管,A 标准管,A 空白管;计算 ΔA=A 测定管-A 空白管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。 |
注:空白管和标准曲线只需做1-2次。
四、纤维素含量计算:
标准曲线的绘制:
根据标准管的浓度(x,mg/mL)和吸光度ΔA 标准(y,ΔA 标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA(y, ΔA)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。
纤维素含量的计算:
(1)按样本质量计算
纤维素(mg/g 质量)=x×V 提取×20×(W2÷W3)÷W1÷1.11=22.52×x×W2÷W3÷W1
(2)按样本细胞壁物质(CWM)质量计算
纤维素(mg/g干重)=x×V 提取×20÷W3÷1.11=22.52x÷W3
1.11:是此法测得葡萄糖含量换算为纤维素含量的常数,即111 µg葡萄糖用蒽酮试剂显色相当于100µg纤维素蒽酮试剂所显示的颜色;V 提取:纤维素提取液体积,1.25mL(0.5mL蒸馏水+0.75mL浓硫酸);20:样本稀释倍数;W1:样本质量,0.3g;W2:样本细胞壁物质(CWM)质量,g;W3,提取纤维素时称取的细胞壁物质(CWM)质量,g。
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