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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
100 T | ¥ 1,512 | 4-6日内发货 |
采用3.5-二硝基水杨酸法测定CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
100T/48S规格的产品组成如下:
组成 | 规格 | 储存条件 |
CB0045M-ES | 60mL×1 瓶 | 4℃保存 |
CB0045M-A | 5mL×1 瓶 | 4℃保存 |
CB0045M-B | 20mL×1 瓶 | 4℃保存 |
CB0045M-C | 5mL×1 瓶 | 4℃保存 |
CB0045MStandard | 粉剂×1 瓶 | 4℃保存 |
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
二、样品测定的前处理:
三、测定步骤:
试剂名称 | 对照管 (μL) | 测定管 (μL) | 标准管 (μL) |
CB0045M-A | 50 | 50 | |
CB0045M-B | 200 | 200 | |
蒸馏水 | 50 | 50 | |
样本 | 50 | ||
煮沸的样本 | 50 | ||
混匀,40℃准确水浴 30min,取出后立即放入沸水中煮沸 15min, 得糖化液,另取EP管。 | |||
糖化液 | 15 | 15 | |
标准液 | 15 | ||
CB0045M-C | 35 | 35 | 35 |
混匀, 沸水浴中煮沸显色 15min,冷却。 | |||
蒸馏水 | 250 | 250 | 250 |
混匀,测 550nm 处吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。 |
注:每个测定管需设一个对照管。
四、CL活力计算:
标准曲线的建立:以浓度(y)为纵坐标,吸光度 A(x,减去浓度为 0 标准管的 OD 值)为横坐标建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA 带入公式中(x)计算浓度 y(mg/mL)。
按照蛋白浓度计算
单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL 活力(U/mg prot)=1000×y×V 反总÷(V 样×Cpr)÷T=233×y÷Cpr
按样本鲜重计算
单位的定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL 活力(U/g 质量)=1000×y×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷T =233×y÷W
按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
CL 活力(U/104 cell)=1000×y×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷T =0.467×y
注: 1000:1mg/mL=1000ug/mL;V 反总:反应体系总体积,0.35mL;V 样:加入样本体积,0.05 mL;V 样总:加入CB0045M-ES体积,1 mL;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。
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