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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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50 T | ¥ 143 | 4-6日内发货 |
H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解 H2O2,使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。
50T/48S规格的产品组成如下:
组成 | 规格 | 储存条件 |
CB0044UV-ES | 60mL×1 瓶 | 4℃保存。 |
CB0044UV-A | 60mL×1 瓶 | 4℃保存。 |
CB0044UV-B | 100μL×3 瓶 | 4℃保存。 |
CAT 检测工作液的配制:用时在每瓶CB0044UV-B中加入 20mL CB0044UV-A,充分混匀,作为工作液;用不完的试剂4℃保存一周。 |
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
紫外分光光度计、1mL石英比色皿、台式离心机、水浴锅、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水。
二、粗酶液提取:
三、测定步骤:
四、CAT 活性计算:
单位的定义:每毫升血清(浆)在反应体系中每分钟催化 1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:CAT (U/mL) = [ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷V 样÷T = 678×ΔA
2. 组织、细菌或细胞中 CAT 活力计算:
(1) 按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化 1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:CAT (U/ mg prot) = [ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr)÷T = 678×ΔA÷Cpr
(2) 按样本鲜重计算:
单位的定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化 1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:CAT (U/g 鲜重) = [ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(W×V 样÷V 样总)÷T = 678×ΔA÷W
3. 按细菌或细胞中 CAT 活力计算:
单位的定义:每 1 万个细菌或细胞在每分钟反应体系中每分钟催化 1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:CAT (U/104 cell) = [ΔA×V 反总÷(ε×d) ×109]÷(500×V 样÷V 样总)÷T = 1.356×ΔA
注: V 反总:反应体系总体积,1.035×10-3L;ε: H2O2 摩尔吸光系数,4.36×104L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.035mL;V 样总:加入CB0044UV-ES体积,1mL;T:反应时间,1min;W,样本质量(g);Cpr:上清液蛋白浓度,mg/mL;500:细胞或细菌总数,500 万; 109:单位换算系数,1 mol=109nmol。
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