BUN Assay Kit (Visible Spectrophotometry)

样本中尿素氮在氯化高铁一磷酸溶液中与二乙酰一肟和硫胺脲共煮，生成一种红色的二嗪化合物，其颜色的深浅与尿素氮含量成正比，采用二乙酰一肟法测定尿素氮含量。

50T/48S规格的产品组成如下：

注：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、天平、研钵、常温离心机、恒温水浴锅。
二、样品处理：

1. 组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水）加入蒸馏水，匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
2. 细胞：按照细胞数量（10⁴个）：蒸馏水体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清或其它液体：直接检测。

三、测定步骤：

1. 分光光度计预热 30min，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。
2. 将1mg/mL尿素氮标准液用蒸馏水稀释至200μg/mL备用。
3. 样品测定（在EP中加入下列试剂）：

注：空白管和标准管分别只需要测定1-2次。
四、尿素氮含量计算：
按照血清或其他液体体积计算

尿素氮含量 (μg/mL) =ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品=200×ΔA 测定÷ΔA 标准
按照样本质量计算

尿素氮含量 (ug/g鲜重) =ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷W=200×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
按照蛋白浓度计算

尿素氮含量 (ug/mg prot) = ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷（Cpr×V 提取）=200×ΔA 测定÷ΔA 标准÷Cpr
按细胞数量计算

尿素氮含量 (ug/10⁴ cell) = ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷细胞数量=200×ΔA 测定÷ΔA 标准÷细胞数量
注：C 标准品：标准品浓度，200μg/mL；V 提取：加入提取液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；细菌或细胞总数：以万计。

1. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。