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BUN Assay Kit (Visible Spectrophotometry)

Synonyms: 尿素氮检测试剂盒(可见分光光度法)
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尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。

BUN Assay Kit (Visible Spectrophotometry)

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货号 CB0037V

别名 尿素氮检测试剂盒(可见分光光度法)

尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。

BUN Assay Kit (Visible Spectrophotometry)
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

样本中尿素氮在氯化高铁一磷酸溶液中与二乙酰一肟和硫胺脲共煮,生成一种红色的二嗪化合物,其颜色的深浅与尿素氮含量成正比,采用二乙酰一肟法测定尿素氮含量。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

50T/48S规格的产品组成如下:

组成 规格 储存条件
CB0037V-A 50mL×1 瓶 4℃避光保存。
CB0037V-B 20mL×1 瓶 4℃保存,用时加双蒸水40mL配成酸应用液
CB0037V-Standard 0.2ml×1 支 4℃保存
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、天平、研钵、常温离心机、恒温水浴锅。

二、样品处理:
1.组织:按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清待测。
2.细胞:按照细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。
3.血清或其它液体:直接检测。

三、测定步骤:
1.分光光度计预热 30min,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2.将1mg/mL尿素氮标准液用蒸馏水稀释至200μg/mL备用。
3.样品测定(在EP中加入下列试剂):

试剂名称 空白管 (μL) 测定管 (μL) 标准管 (μL)
样本 20
蒸馏水 20
标准品 20
CB0037V-A 1000 1000 1000
CB0037V-B 1000 1000 1000
混匀,沸水浴10min,冷却后,540nm下测定吸光值,记为A 空白、A 标准、A 测定,△A 标准=A 标准-A 空白,△A 测定 =A 测定-A 空白。
注:空白管和标准管分别只需要测定1-2次。

四、尿素氮含量计算:
1.按照血清或其他液体体积计算

  1. 按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算:
    尿素氮含量 (umol/mL) =ΔA测定÷ΔA标准×C 标准品=10×ΔA测定÷ΔA标准
  2. 按细胞数量计算:
    尿素氮含量(umol/104 cell)=ΔA测定÷ΔA标准×C 标准品×V 提取÷细胞数量=10×ΔA测定÷ΔA标准÷细胞数量
  3. 按照样本质量计算:
    尿素氮含量 (μmol/g鲜重) = ΔA测定÷ΔA标准×C 标准品×V 提取÷W=10×ΔA测定÷ΔA标准÷W
  4. 按照蛋白浓度计算:
    尿素氮含量 (μmol/mg prot) = ΔA 测定÷ΔA标准×C 标准品×V 提取÷(Cpr×V提取)=10×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr
    注:C标准品:标准品浓度,10μmol/mL;V提取:提取液体积,1mL;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,
    mg/mL;细胞数量:以万计。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

  1. 比色前若发现沉淀,则可3500转/分离心10分钟。
  2. 颜色太深时,将样品作适当稀释,结果再乘以稀释倍数。
    3.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
    4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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CB0037V - BUN Assay Kit (Visible Spectrophotometry) - 说明书-中文.pdf
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