BUN Assay Kit (Microanalysis)

在加热和强酸条件下，尿素氮与二乙酰肟缩合成红色的联吖嗪，其颜色深浅与尿素氮含量成正比，根据色泽的深浅可以计算出尿素氮含量。

100T/96S规格的产品组成如下：

注：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、研钵、离心机、恒温水浴锅。
二、样品处理：

1. 组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水）加入蒸馏水，匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
2. 细胞：按照细胞数量（10⁴个）：蒸馏水体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清或其它液体：直接检测或适当稀释。

三、测定步骤：

1. 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 520nm，蒸馏水调零。
2. 样品测定（在EP管中加入下列试剂）：

注：空白管和标准管只需要测定1-2次。

四、尿素氮含量计算：
按照血清（浆）或者细胞培养液体积计算：

尿素氮含量 (umol/mL) =ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品=10×ΔA 测定÷ΔA 标准
按细胞数量计算：

尿素氮含量（umol/10⁴ cell）=ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷细胞数量=10×ΔA 测定÷ΔA 标准÷细胞数量
按照样本质量计算：

尿素氮含量 (μmol/g鲜重) = ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷W=10×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
按照蛋白浓度计算：

尿素氮含量 (μmol/mg prot) = ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷（Cpr×V 提取）=10×ΔA 测定÷ΔA 标准÷Cpr
注：C 标准品：标准品浓度，10μmol/mL；V 提取：提取液体积，1mL；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；细胞数量：以万计。

1. 比色前若发现沉淀，则可3500转/分离心10分钟。
2. 颜色太深时，将样品作适当稀释，结果再乘以稀释倍数。
3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。