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100 T

¥ 286

10-12日内发货

产品组成

100T/96S规格的产品组成如下：

组成	规格	储存条件
CB0037M-A	100mL×1瓶	4℃保存。
CB0037M-B	40mL×1瓶	4℃保存，用时加双蒸水80mL配成酸应用液。
CB0037M-Standard（10umol/mL）	0.5mL×1支	4℃保存。

注：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、研钵、离心机、恒温水浴锅。

二、样品处理：
1.组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水）加入蒸馏水，匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
2.细胞：按照细胞数量（10⁴个）：蒸馏水体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清或其它液体：直接检测或适当稀释。

三、测定步骤：
1.分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 520nm，蒸馏水调零。
2.样品测定（在EP管中加入下列试剂）：

试剂名称	空白管 (μL)	测定管 (μL)	标准管 (μL)
样本		20
蒸馏水	20
标准品			20
CB0037M-A	1000	1000	1000
CB0037M-B应用液	1000	1000	1000
混匀，准确沸水浴15min，冷却后，从上述反应液中吸取 200μL于96 孔板/微量玻璃比色皿中测定520nm的吸光值。记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管，计算 ΔA 标准=A 标准管-A 空白管，ΔA 测定=A 测定管-A 空白管。

注：空白管和标准管只需要测定1-2次。

四、尿素氮含量计算：
1.按照血清（浆）或者细胞培养液体积计算：

尿素氮含量 (umol/mL) =ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品=10×ΔA 测定÷ΔA 标准
2.按细胞数量计算：

尿素氮含量（umol/10⁴ cell）=ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷细胞数量=10×ΔA 测定÷ΔA 标准÷细胞数量
3.按照样本质量计算：

尿素氮含量 (μmol/g鲜重) = ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷W=10×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
4.按照蛋白浓度计算：

尿素氮含量 (μmol/mg prot) = ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准品×V 提取÷（Cpr×V 提取）=10×ΔA 测定÷ΔA 标准÷Cpr
注：C 标准品：标准品浓度，10μmol/mL；V 提取：提取液体积，1mL；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；细胞数量：以万计。

注意事项

1.比色前若发现沉淀，则可3500转/分离心10分钟。
2.颜色太深时，将样品作适当稀释，结果再乘以稀释倍数。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

BUN Assay Kit (Microanalysis)

检测原理

产品组成

操作说明

注意事项

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引用文献