Alkaline Xylanase Assay Kit (Spectrophotometry)

BAX 在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 BAX 活力。

50T/24S规格的产品组成如下：

一、自备用品：
可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、天平、低温离心机、恒温水浴锅，蒸馏水。
二、粗酶液提取：

1. 发酵液：发酵液于 8000g，4℃，离心 15min，取上清，作为待测样品。
2. 酶干粉：称约 0.1mg，加缓冲液 1mL，震荡溶解待测。
3. 组织样本：称约 0.1g 组织，加入 1mL 缓冲液，冰上充分研磨。8000rpm，4℃，离心 15min，
   取上清蒸馏水 稀释 10 倍待测。
   三、检测步骤：
4. 分光光度计预热 30min，调节波长到540 nm，蒸馏水调零。
5. 在EP管中按顺序加入下列试剂：

1.发酵液 BAX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH9.0 条件下，每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX 活力 (nmol/min /mL) = 5x1000x(A540+0.0293)÷2.8432x150x30=391x(A540+0.0293)
注： 150：木糖的分子量，30：反应时间，5：稀释倍数(1mL÷0.2mL=5)，1000：转化因子，即 1mmol/L=1000μmol/L。
2.酶干粉 BAX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH9.0 条件下，每毫克酶每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX 活力 (nmol/min /mL) = 5x1000x(A540+0.0293)÷2.8432x150x30xW = 391x(A540+0.0293)÷W
注： 150：木糖的分子量，30：反应时间，5：稀释倍数（1mL÷0.2mL=5），1000：转化因子，即 1mmol/L=1000μmol/L；W：样品质量：mg。

1.吸光度变化应该控制在 0.01-1.0 之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变；也可以延长或者缩短反应时间。
2.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。