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Alkaline Xylanase Assay Kit (Microanalysis)

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货号 CB0001M

别名 碱性木聚糖酶(BAX)活性检测试剂盒(微量法)

碱性木聚糖酶 (Alkaline Xylanase, BAX) (EC 3.2.1.8) 是在碱性条件下具有较高酶活的木聚糖酶,其活性成分就是木聚糖酶。主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,BAX 一般分离自最适生长 pH 为 9 -11 的微生物。

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货号 CB0001M 别名 碱性木聚糖酶(BAX)活性检测试剂盒(微量法)

碱性木聚糖酶 (Alkaline Xylanase, BAX) (EC 3.2.1.8) 是在碱性条件下具有较高酶活的木聚糖酶,其活性成分就是木聚糖酶。主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,BAX 一般分离自最适生长 pH 为 9 -11 的微生物。

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产品介绍


生物活性
产品描述
碱性木聚糖酶 (Alkaline Xylanase, BAX) (EC 3.2.1.8) 是在碱性条件下具有较高酶活的木聚糖酶,其活性成分就是木聚糖酶。主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,BAX 一般分离自最适生长 pH 为 9 -11 的微生物。
别名碱性木聚糖酶(BAX)活性检测试剂盒(微量法)
储存&溶解度
存储store at 4°C

Handling Instruction | TargetMol 检测原理

BAX 在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 BAX 活力。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

100T/48S规格的产品组成如下:

组成 规格 储存条件
CB0001M-ES 65mL×1 瓶 4℃保存
CB0001M-A 10mL×1 瓶 4℃避光保存
CB0001M-B 10mL×1 瓶 4℃避光保存

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

1.自备用品:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
2.粗酶液提取:
1)发酵液:发酵液于 8000g,4℃,离心 15min,取上清,作为待测样品。
2)酶干粉:称约 0.1mg,加缓冲液 1mL,震荡溶解待测。
3.检测步骤:
1)分光光度计预热 30min,调节波长到540nm,蒸馏水调零。
2)在EP管中按顺序加入下列试剂:

对照管 (µL) 测定管 (µL)
样品 60 60
CB0001M-ES 90 90
CB0001M-A 60
CB0001M-B 90
混匀,盖紧瓶盖,50℃水浴,反应 30min,立即沸水浴 10min 灭活(注意不要让盖子爆开,以免进水改变反应体系)。
CB0001M-A 60
CB0001M-B 90
混匀,沸水浴显色 5min(注意不要让盖子爆开,以免进水改变反应体系),取 200µL 于微量石英比色皿/96 孔板中,对照管调零,测定 A540。
4.计算公式:

1)用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 2.8432x - 0.0293,R2 = 0.9985
a.发酵液 BAX 活力计算:
酶活定义:50℃,pH9.0 条件下,每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX 活力 (nmol/min /mL) = 5x1000x(A540+0.0293)÷2.8432x150x30=391x(A540+0.0293)
注:150:木糖的分子量,30:反应时间,5:稀释倍数(300µL÷60µL=5),1000:转化因子,即 1mmol/L=1000μmol/L
b.酶干粉 BAX 活力计算:
酶活定义:50℃,pH9.0 条件下,每毫克酶每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX 活力 (nmol/min /mL) = 5x1000x(A540+0.0293)÷2.8432x150x30xW=391x(A540+0.0293)÷W
注:150:木糖的分子量,30:反应时间,5:稀释倍数 (300µL÷60µL=5),1000:转化因子,即 1mmol/L=1000μmol/L;W:样品质量:mg。
2)用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 1.4216x - 0.0293,R2 = 0.9985
a.发酵液BAX 活力计算
酶活定义:50℃,pH9.0 条件下,每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX 活力 (nmol/min /mL) = (A540+0.0293)÷1.4216÷150÷T×稀释倍数×1000 = 782×(A540+ 0.0293 )
b.酶干粉BAX 活力计算
酶活定义:50℃,pH9.0 条件下,每毫克酶每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX 活力 (nmol/min /mg) = (A540+0.0293)÷1.4216÷150÷T×稀释倍数×1000 ÷W= 782×(A540+ 0.0293)÷W
注:150:木糖的分子量;T:反应时间,30min;稀释倍数=V反总÷V样=300µL÷60µL=5;1000:转化因子,即 1mmol/L=1000μmol/L ;W:样品质量:mg。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.吸光度变化应该控制在 0.01-0.8 之间,否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变;也可以延长或者缩短反应时间。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Handling Instruction | TargetMol 存储条件

试剂盒 2-8℃保存,保质期 3 个月,建议尽快使用。

计算器

  • 摩尔浓度 计算器
  • 稀释 计算器
  • 配液 计算器
  • 分子量 计算器

体内实验配液计算器

请在以下方框中输入您的动物实验信息后点击计算,可以得到母液配置方法和体内配方的制备方法:
TargetMol | Animal experiments 比如您的给药剂量是10 mg/kg,每只动物体重20g,给药体积100 μLTargetMol | Animal experiments 一共给药动物10只,您使用的配方为5%TargetMol | reagent DMSO + 30%PEG300 + 5%Tween 80 + 60%Saline/PBS/ddH2O , 那么您的工作液浓度为2mg/mL
母液配置方法: 2 mg 药物溶于 50 μLDMSOTargetMol | reagent ( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们联系。
体内配方的制备方法:50μLDMSOTargetMol | reagent 母液,添加 300 μLPEG300TargetMol | reagent 混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2OTargetMol | reagent 混匀澄清

以上为“体内实验配液计算器”的使用方法举例,并不是具体某个化合物的推荐配制方式,请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。

方案所需的各类助溶剂如: DMSOPEG300 / PEG400Tween 80SBE-β-CD玉米油 等, 均可在TargetMol网站点击购买。
1 请输入动物实验的基本信息
mg/kg
g
μL
2 请输入动物体内配方组成,不同的产品配方组成不同,如有配方需求,可先联系我们提供正确的体内配方。
% DMSO
%
% Tween 80
% Saline/PBS/ddH2O

剂量转换

对于不同动物的给药剂量换算,您也可以参考 更多

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