Acridine Orange Staining Solution

1. 对DNA与RNA呈差异化染色，能同时实现对两种核酸的荧光标记。
2. 适用性广，能用于对细胞、组织、细菌和真菌的核酸标记。
3. 操作简便。
4. 性价比高。

细胞凋亡检测、抗癌药物筛选、细胞周期检测、细胞增殖动力学分析。

用PBS或ddH2O将吖啶橙储备液稀释为0.5-100 μg/mL的吖啶橙染色工作液（避光操作）。具体浓度根据样本和实验需要进行调整。

1. 对于贴壁细胞：
   （1）吸除孔板中的培养液，用PBS洗涤2次，每次2 min。
   （2）加入吖啶橙工作液，室温染色5-15 min，吸除染色液，PBS洗涤2次，每次2 min。
   （3）加入适量PBS缓冲液覆盖孔板底部，置于荧光显微镜下观察。可根据实验需求，设置适合的激发波长和发射波长以检测荧光。若需观察绿色荧光，建议设置Ex=488 nm，Em=530 nm左右；若观察红色荧光，建议设置Ex=530 nm，Em=640 nm左右。
2. 对于悬浮细胞：
   （1）将细胞悬液以600×g室温离心3 min，弃上清。加适量PBS重悬，600×g室温离心3 min，弃上清。
   （2）加适量吖啶橙工作液，室温染色5-15 min。
   （3）直接滴加于载玻片上，或600×g室温离心3 min，弃上清，加PBS重悬后滴加于载玻片上。盖上盖玻片，直接置于荧光显微镜下观察，或者用抗荧光淬灭的封片液封片之后再镜下观察。可根据实验需求，设置适合的激发波长和发射波长以检测荧光。若需观察绿色荧光，建议设置Ex=488 nm，Em=530 nm左右；若观察红色荧光，建议设置Ex=530 nm，Em=640 nm左右。

-20℃避光保存，一年有效。

1. 用吖啶橙染色时，染色液体积并非固定值，覆盖住细胞即可。
2. 直接将染色后的细胞滴加到载玻片上，能避免离心导致的细胞聚团；而离心去除染色液，能适当降低荧光背景。建议根据自己的实验需求，选择是否染色后离心。
3. 吖啶橙溶液对光敏感，染色过程中建议在避光条件下进行，以减少荧光衰减。
4. 本品仅适用于专业科研用途，严禁用于临床诊断、治疗、食品或药品领域，且不得存放于住宅等非专业场所。
5. 吖啶橙具有潜在毒性和致突变性，可通过皮肤接触或吸入危害健康。为保障操作安全与人员健康，操作时请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。