Acidic Xylanase Assay Kit (Microanalysis)

ACX 在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，进一步在沸水浴条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 ACX 活力。

100T/48S规格的产品组成如下：

一、自备用品：
天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
二、粗酶液提取：

1. 发酵液：发酵液于 8000g，4℃，离心 15min，取上清，作为待测样品。
2. 酶干粉：称约 0.1mg，加 1mL CB0011M-ES溶解待测。
   三、测定操作：
   1.分光光度计预热 30min，调节波长到540 nm，蒸馏水调零。
   2.在EP管中按顺序加入下列试剂：

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下：
标准曲线：y = 2.5554x - 0.002 ，R² = 0.9983
1.发酵液 ACX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH4.8 条件下，每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX 活力(nmol/min/mL) = (A540+0.002)÷2.5554÷150÷T×稀释倍数×1000=435×(A540+0.002)
2.酶干粉 ACX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH4.8 条件下，每毫克酶每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX 活力 (nmol/min/mL) = (A540+0.002)÷2.5554÷150÷T×稀释倍数×1000÷W=435×(A540+0.002)÷W
注： 计算公式中：150：木糖的分子量，30：反应时间，5：稀释倍数（300μL÷60μL=5），1000：转化因子，即 1mmol/L =1000μmol/L，W：样本质量，mg
b.用96孔板测定的计算公式如下：
标准曲线：y = 1.2777x - 0.002 ，R² = 0.9983
1.发酵液ACX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH4.8 条件下，每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX 活力 (nmol/min/mL) = (A540+0.002)÷1.2777÷150÷T×稀释倍数×1000= 870×(A540+0.002)
2.酶干粉ACX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH4.8 条件下，每毫克酶每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX 活力 (nmol/min/mg) =(A540+0.002)÷1.2777÷150÷T×稀释倍数×1000÷W= 870×(A540+0.002 ) ÷W
注： 计算公式中：150：木糖的分子量；T：反应时间，30min；稀释倍数=V反总÷V样=300µL÷60µL=5；1000：转化因子，即 1mmol/L =1000μmol/L ；W：样本质量，mg。

1.吸光度变化应该控制在 0.01-0.8 之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

试剂盒 2-8℃保存，保质期 3 个月，建议尽快使用。