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Acidic Xylanase Assay Kit (Spectrophotometry)

Acidic Xylanase Assay Kit (Spectrophotometry)

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Acidic Xylanase Assay Kit (Spectrophotometry)
产品编号 CB0011S
别名 酸性木聚糖酶(ACX)活性检测试剂盒(分光光度法)
酸性木聚糖 (Acidic, ACX) (EC 3.2.1.8) 主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。
规格价格库存数量
50 T
¥ 506
4-6日内发货
大包装 & 定制
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

ACX 在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 ACX 活力。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

50T/24S规格的产品组成如下:

组成 规格 储存条件
CB0011S-ES 40mL×1 瓶 4℃保存
CB0011S-A 6mL×1 瓶 4℃避光保存
CB0011S-B 10mL×1 瓶 4℃避光保存
CB0011S-Standard 粉剂×1 支 4℃保存;临用前加入667μL提取液配成 100μmol/mL的标准品溶液,2-8℃保存8周。
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、天平、低温离心机、恒温水浴锅、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
二、粗酶液提取:
1.发酵液:发酵液于 8000g,4℃,离心 15min,取上清,作为待测样品。
2.酶干粉:称约 0.1mg,加 1mL CB0011S-ES溶解待测。
三、测定操作:
1.分光光度计预热 30min,调节波长到540 nm,蒸馏水调零。
2.标准品稀释:使用前将100μmol/mL标准液用缓冲液稀释50倍,配制成2μmol/mL的标准液备用,现用现配。
3.在1mL玻璃比色皿中按顺序加入下列试剂:

试剂名称 对照管 (µL) 测定管 (µL) 空白管 (µL) 标准管 (µL)
样品 200 200
CB0011S-ES 300 300 500 300
标准品 200
CB0011S-A 200 200 200
CB0011S-B 300
混匀,50℃水浴中反应 30min,立即沸水浴中 10min 灭活。(注意不要让盖子爆开,以免进水,改变了反应体系)
CB0011S-A 200
CB0011S-B 300 300 300
混匀,沸水浴中显色 5min(注意不要让盖子爆开,以免进水改变了反应体系),冷却后尽快测定各管540nm下的吸光度,分别记为A测定、A对照、A标准、A空白。空白管和标准管只需做1-2次。
四、计算公式:

1.发酵液 ACX 活力计算:
酶活定义:50℃,pH4.8 条件下,每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX 活力 (U/mL) = C标准×(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)÷T
= 0.067×(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)
2.酶干粉 ACX 活力计算:
酶活定义:50℃,pH4.8 条件下,每毫克酶每分钟分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX 活力 (U/mL) =C标准×(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)×V提取÷W1÷T
= 0.067×(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)÷W1
注:C 标准:木糖标准溶液浓度,2μmol/mL;V提取:加入缓冲液体积,1mL;W1:酶干粉重量,mg;T:反应时间,30min。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.吸光度变化应该控制在0.01-1.0之间,否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。