Acidic Xylanase Assay Kit (Spectrophotometry)

ACX 在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，进一步在沸水浴条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 ACX 活力。

50T/24S规格的产品组成如下：

一、自备用品：
可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、天平、低温离心机、恒温水浴锅、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
二、粗酶液提取：
1.发酵液：发酵液于 8000g，4℃，离心 15min，取上清，作为待测样品。
2.酶干粉：称约 0.1mg，加 1mL CB0011S-ES溶解待测。
三、测定操作：
1.分光光度计预热 30min，调节波长到540 nm，蒸馏水调零。
2.标准品稀释：使用前将100μmol/mL标准液用缓冲液稀释50倍，配制成2μmol/mL的标准液备用，现用现配。
3.在1mL玻璃比色皿中按顺序加入下列试剂：

1.发酵液 ACX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH4.8 条件下，每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX 活力 (U/mL) = C标准×（A测定-A对照）÷（A标准-A空白）÷T
= 0.067×（A测定-A对照）÷（A标准-A空白）
2.酶干粉 ACX 活力计算：
酶活定义：50℃，pH4.8 条件下，每毫克酶每分钟分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酸性木聚糖酶的活力单位。
ACX 活力 (U/mL) =C标准×（A测定-A对照）÷（A标准-A空白）×V提取÷W1÷T
= 0.067×（A测定-A对照）÷（A标准-A空白）÷W1
注：C 标准：木糖标准溶液浓度，2μmol/mL；V提取：加入缓冲液体积，1mL；W1：酶干粉重量，mg；T：反应时间，30min。

1.吸光度变化应该控制在0.01-1.0之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。