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Acetaldehyde Dehydrogenase Assay Kit (Microanalysis)

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货号 CB0006M

别名 乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒（微量法）

乙醛脱氢酶 (Acetaldehyde Dehydrogenase, ALDH) (EC 1.2.1.10) 是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸，在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内，线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注； 同时，乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。

Acetaldehyde Dehydrogenase Assay Kit (Microanalysis)

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货号 CB0006M 别名 乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒（微量法）

乙醛脱氢酶 (Acetaldehyde Dehydrogenase, ALDH) (EC 1.2.1.10) 是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸，在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内，线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注； 同时，乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。

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¥ 1,555
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产品介绍

生物活性
产品描述
乙醛脱氢酶 (Acetaldehyde Dehydrogenase, ALDH) (EC 1.2.1.10) 是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。主要作用是将乙醛氧化成乙酸，在酒精代谢中起主要作用。在人类和许多动物体内，线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注； 同时，乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。
别名乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒（微量法）
化学信息
颜色Transparent
物理性状Liquid
储存&溶解度
存储keep away from direct sunlight

Handling Instruction | TargetMol 检测原理

在辅酶Ⅰ存在的条件下，乙醛脱氢酶催化乙醛和 NAD+转化为乙酸和 NADH，在 340nm 处的吸光值会增加，测定 340nm 处的吸光值变化，可计算得到乙醛脱氢酶的活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

100T/96S规格的产品组成如下：

组成 规格 储存条件
CB0006M-ES 100mL ×1 瓶 4℃保存
CB0006M-A 6mL ×1 瓶 4℃保存
CB0006M-B 2mL×1 瓶 4℃避光保存
CB0006M-C 1mL ×1 瓶 4℃避光保存
CB0006M-D 1mL ×1 瓶 4℃保存
CB0006M-E 1mL ×1 瓶 4℃保存

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品：
天平、离心机、紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、微量石英比色皿/96 孔板（UV板）、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

二、ALDH 提取：

  1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5-10 的比例（建议称取约 0.1g组织，加入 1mL CB0006M-ES）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃，离心 20min，取上清置于冰上待测。
  2. 细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500-1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL CB0006M-ES），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔7秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
  3. 液体：直接检测或适当稀释后再进行检测。

三、测定步骤：

  1. 紫外分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 340nm，紫外分光光度计蒸馏水调零。
  2. 将CB0006M-A 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）预热 15min。
  3. 在微量石英比色皿/96 孔板中依次加入下列试剂：
试剂名称 空白管 (µL) 测定管 (µL)
上清 40
CB0006M-A 60 60
CB0006M-B 20 20
CB0006M-C 10 10
CB0006M-D 10 10
CB0006M-E 10 10
蒸馏水 90 50
充分混匀，并开始计时，测定1min时340nm 处吸光值 A1空白和A1测定，然后迅速置于 37℃水浴 1min，于 340nm 处测定吸光值 A2空白和A2测定，计算△A对照= A2对照-A1对照，△A测定= A2测定-A1测定，∆A=∆A测定-∆A空白。
注：空白管只需做1-2次。

四、ALDH 酶活计算：
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1.按蛋白浓度计算
酶活定义：每毫克蛋白每分钟催化还原1nmol NAD+ 的酶量为1个酶活单位。
ALDH 酶活 (U/mg prot) = △A÷(ε×d) ×109×V反总÷(V样×Cpr)÷T = 804×△A÷Cpr
2.按样本质量计算
酶活定义：每克样品每分钟催化还原1nmol NAD+ 的酶量为1个酶活单位。
ALDH 酶活 (U/g) = △A÷(ε×d) ×109 ×V反总÷(V样×W÷V样总)÷T =804×△A÷W
3.按照细胞数量计算
酶活定义：每104个细胞每分钟催化还原1nmol NAD+ 的酶量为1个酶活单位。
ALDH 酶活 (U/104 cell) = △A÷ (ε×d) ×109×V反总÷[V样÷V样总×细胞数量(万个)]÷T
=804×△A÷细胞数量(万个)
4.按液体体积计算
酶活定义：每毫升蛋白每分钟催化还原1nmol NAD+ 的酶量为1个酶活单位。
ALDH 酶活 (U/mL) = △A÷(ε×d) ×109×V反总÷V样÷T =804×△A
注：ε：NADH 微摩尔消光系数，6.22×103 L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应体系总体积，0.2mL；V样：反应体系中样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，1min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。
b.使用96孔板测定的计算公式如下
1.按样本蛋白浓度计算
酶活定义：每毫克蛋白每分钟催化还原1 nmol NAD+ 的酶量为1个酶活单位。
ALDH 酶活 (U/mg prot) = △A÷(ε×d) ×109×V反总÷(V样×Cpr)÷T = 1608×△A÷Cpr
2.按样本质量计算
酶活定义：每克样品每分钟催化还原1 nmol NAD+ 的酶量为1个酶活单位。
ALDH 酶活 (U/g) = △A÷(ε×d) ×109×V反总÷(V样×W÷V样总)÷T = 1608×△A÷W
3.按照细胞数量计算
酶活定义：每104个细胞每分钟催化还原1 nmol NAD+ 的酶量为1个酶活单位。
ALDH 酶活 (U/104 cell) = △A÷(ε×d)×109×V反总÷[V样÷V样总×细胞数量(万个)]÷T
=53.59×△A÷细胞数量(万个)
4.液体体积计算
酶活定义：每毫升蛋白每分钟催化还原 1 nmol NAD+ 的酶量为1个酶活单位。
ALDH 酶活 (U/mL) = △A÷(ε×d) ×109×V反总÷V样÷T =1608×△A
注：ε：NADH 微摩尔消光系数，6.22×103 L/mol/cm；d：96 孔板光径，0.5cm；V反总：反应体系总体积，0.2mL；V样：反应体系中样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，1min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.当样品 ΔA大于1时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定；当 ΔA小于0.01时，可以延长反应时间来测定，并注意计算时同步更改计算公式。
2.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

计算器

  • 摩尔浓度 计算器
  • 稀释 计算器
  • 配液 计算器
  • 分子量 计算器

体内实验配液计算器

请在以下方框中输入您的动物实验信息后点击计算，可以得到母液配置方法和体内配方的制备方法：
TargetMol | Animal experiments 比如您的给药剂量是10 mg/kg，每只动物体重20g，给药体积100 μL， TargetMol | Animal experiments 一共给药动物10只，您使用的配方为5%TargetMol | reagent DMSO + 30%PEG300 + 5%Tween 80 + 60%Saline/PBS/ddH2O ， 那么您的工作液浓度为2mg/mL。
母液配置方法: 2 mg 药物溶于 50 μLDMSOTargetMol | reagent （ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们联系。
体内配方的制备方法: 取 50μLDMSOTargetMol | reagent 母液，添加 300 μLPEG300TargetMol | reagent 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2OTargetMol | reagent 混匀澄清

以上为“体内实验配液计算器”的使用方法举例，并不是具体某个化合物的推荐配制方式，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。

方案所需的各类助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可在TargetMol网站点击购买。
1 请输入动物实验的基本信息
mg/kg
g
μL
2 请输入动物体内配方组成，不同的产品配方组成不同，如有配方需求，可先联系我们提供正确的体内配方。
% DMSO
%
% Tween 80
% Saline/PBS/ddH2O

剂量转换

对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多

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