TNF-α-IN-28 (compound 4ea) 在 1-30 μM 范围内可显著抑制 LPS 诱导的 RAW 264.7 巨噬细胞中 TNF-α 表达，IC50 为 6.297 μM；在 30 μM 时可抑制 LPS 刺激的 RAW 264.7 巨噬细胞中 NF-κB 核转位，从而抑制 NF-κB 激活。TNF-α-IN-28 可稳定结合 TNF-α 二聚体界面 (PDB ID: 2AZ5)，平均结合亲和力为 -8.02 Kcal/mol，并与对 TNF-α 抑制及功能关键的残基形成重要相互作用；在 500 ns 分子动力学模拟中，该化合物可维持 TNF-α (PDB ID: 2AZ5) 结构稳定及稳定结合构象。