方法：人急性髓系白血病细胞用 TH9028 处理，采用生化检测方法测定其对 MTHFD2 的抑制活性（IC50），并通过检测复制叉速度、复制应激、细胞周期阻滞及凋亡指标评估其细胞学效应。
结果：TH9028 对 MTHFD2 表现出强效抑制，IC50 为 11 nM；同时也可抑制 MTHFD1 和 MTHFD2L，IC50 分别为 0.5 nM 和 27 nM，显示非选择性抑制。TH9028 处理后导致急性髓系白血病细胞复制叉速度降低、复制应激增加、S 期阻滞及细胞凋亡[1]。
方法：人急性髓系白血病 HL-60 细胞、人急性T淋巴细胞白血病 Jurkat 细胞、非致瘤性淋巴母细胞系 LCL-534 和 LCL-889 用 TH9028 处理 96 h，使用细胞活力检测方法评估细胞增殖抑制情况。
结果：TH9028 在 AML 细胞和 Jurkat 细胞中表现出强效抗增殖作用，但对非致瘤性 LCL 细胞活力影响较小，显示出对 MTHFD2 表达阳性的癌细胞的选择性毒性[2]。
方法：人急性髓系白血病 HL-60 细胞用 TH9028 (50 nM) 处理 96 h，使用 Annexin-V/PI 双染法结合流式细胞术检测细胞凋亡。
结果：TH9028 在 HL-60 细胞中显著诱导晚期凋亡（Annexin-V 和 PI 双阳性）[2]。
方法：人急性髓系白血病 HL-60 细胞和 THP-1 细胞用 TH9028 (50 nM) 处理 24 h，使用 DNA 纤维实验检测复制叉速度。
结果：TH9028 处理显著降低了 HL-60 和 THP-1 细胞中的 DNA 复制叉速度，表明其诱导了复制压力[2]。

方法：采用急性髓系白血病异种移植小鼠模型，给予 TH9028 治疗，观察肿瘤生长抑制及相关药效指标。
结果：TH9028 在急性髓系白血病小鼠模型中抑制肿瘤生长，并通过诱导胸腺嘧啶耗竭和复制应激发挥抗肿瘤作用[1]。
方法：尾静脉注射 HL-60 细胞建立异种移植瘤模型的 NOG 小鼠，给予 TH9028 治疗（30 mg/kg，每日两次），设置低叶酸饮食组和标准饮食组，通过 Kaplan-Meier 生存曲线评估小鼠总生存期。
结果：在低叶酸饮食条件下，与溶剂对照组相比，TH9028 (30 mg/kg) 治疗显著延长了荷瘤小鼠的总生存期（P = 0.001）[2]。