Sulfo-Cy5.5 Trifluoroacetate is a kind of cyano dye, which is very suitable for non-invasive in vivo near-infrared imaging, and is suitable for applications that require a low fluorescence background.

一、 体内成像
实验步骤：
1.溶液制备：将Sulfo-Cy5.5 Trifluoroacetate溶解在适当的溶剂中，如二甲基亚硫酰胺（DMSO）或PBS，浓度根据体内实验要求（通常为50-500 µM）进行调配。
2.给药：根据实验设计，选择通过静脉注射或皮下注射的方式将溶液注入动物模型。
3.体内成像：使用近红外荧光成像系统进行体内成像。激发波长通常为675 nm，发射波长为694 nm。根据实验需要，选择合适的时间点捕捉成像数据，监测染料在体内的分布和清除。
4. 数据分析：分析不同组织部位的荧光强度，评估染料的分布、定位以及清除情况。
二、 体外组织成像
实验步骤：
1.注射和灌注：按照体内成像方法注射Sulfo-Cy5.5 Trifluoroacetate，经过一定时间后，将动物安乐死并取出组织进行分析。
2.组织准备：使用PBS清洗组织，去除多余的溶液，然后处理组织进行体外成像。
3.成像：使用体内成像系统或荧光显微镜进行组织切片成像，选择合适的滤光片进行成像，观察染料在组织中的分布情况。
4. 定量分析：通过测量不同组织部位的荧光强度，定量分析染料的分布情况。
三、生物分子标记
实验步骤：
1. 偶联：Sulfo-Cy5.5 Trifluoroacetate可以通过标准的偶联反应（如NHS酯与氨基反应）偶联到蛋白质、肽或其他生物分子上。
2. 纯化：偶联反应完成后，使用透析或尺寸排阻色谱法纯化标记的生物分子，去除未反应的染料。
3. 体内成像：将标记的生物分子注入动物模型，使用近红外荧光成像系统监测生物分子在体内的分布和动态。
4. 数据分析：利用荧光信号，分析标记生物分子在体内的分布、动态行为以及与病理过程的关系。
四、 细胞成像
实验步骤：
1. 细胞标记：在细胞培养实验中，Sulfo-Cy5.5 Trifluoroacetate可通过偶联到抗体、肽或其他细胞靶向分子上来标记细胞。将偶联染料加入到培养的细胞中，浓度根据实验需求进行优化。
2.孵育：与染料溶液孵育细胞，时间通常为30分钟至1小时。
3. 清洗：孵育结束后，使用PBS洗涤细胞，去除未结合的染料。
4. 荧光成像：使用荧光显微镜或近红外成像系统捕捉细胞图像，通常使用Cy5.5发射波段（约694 nm）来监测细胞对染料的摄取和定位。