Red-HyP-1 is a red dye that can be used for in vivo hypoxia imaging. The maximum emission maximum of Red-HyP-1 is 798 nm.

在缺氧条件下，CYP450酶与N-氧化物基团反应，经过两电子还原生成未封端的染料（Red-HyP-1），从而导致发射光谱红移。HyP-1的最大吸收和发射波长分别为670 nm和697 nm，而Red-HyP-1（转化产物）的最大吸收和发射波长分别为760 nm和798 nm。[1]

使用方法
1. 溶液制备
储备液：将 Red-HyP-1 溶解于无水 DMSO 或 DMF 中，配制成 1–10 mM 的储备液。
工作液：使用实验缓冲液（如 PBS，pH 7.4）稀释至 1–10 µM 的工作浓度。
2.实验步骤
体外实验
1）将 Red-HyP-1 加入样品溶液（如细胞培养基或生物缓冲液）中。
2）孵育 30 分钟至 1 小时，37°C，避免光照。
3）检测荧光信号：
激发波长：720–750 nm
发射波长：798 nm
体内缺氧成像
1.将 Red-HyP-1 注射到实验动物体内（如尾静脉注射，具体剂量视实验设计而定，通常为 1–5 mg/kg）。
注射后等待 30 分钟至 1 小时，使用荧光成像仪进行检测。
2. 信号检测设备
使用近红外荧光成像系统或荧光显微镜记录信号。
3. 校准与对照
1） 对照实验：设置正常氧浓度（如 20% O₂）和低氧浓度（如 1% O₂）的对照组。验证信号是否与缺氧相关。
2）标准曲线：通过已知氧浓度梯度下的样品，建立荧光信号与氧浓度的关系曲线。
注意事项
1）光敏性：Red-HyP-1 对光敏感，实验全程避免强光照射以防止荧光信号衰减。
2）储存条件：Red-HyP-1 应储存在 -20°C 避光条件下，避免反复冻融。
3）溶解稳定性：确保溶液在使用前充分溶解；必要时可通过低速离心去除未溶解颗粒。