HK2-IN-4 (Compound 106) 在 5 μM 处理 30 min 时可强效且选择性抑制重组 HK2 酶活性，IC 50 为 0.79 μM，而对 HK1、HK3 和 HK4 的 IC 50 分别为 78.47 μM、60.86 μM 和 46.14 μM；在 10-100 μM 处理 24-72 h 时，可选择性抑制高表达 HK2 的结直肠癌细胞 (SW480、LOVO、HCT116) 活力，在缺氧条件下 72 h IC 50 低至 5.00 μM，且其活性较常氧条件更强，细胞毒性呈 HK2 表达依赖性；在 0-40 μM 处理 6 h 时，可于缺氧条件下剂量依赖性降低 HCT116 和 SW480 细胞中的线粒体 HK2 水平；50 μM 处理 7 h 可显著降低 SW480 细胞中 HK2 与 VDAC1 的共定位并破坏 HK2-VDAC1 相互作用；50-100 μM 处理 2 h 可抑制缺氧条件下 SW480 和 HCT116 WT 细胞的糖酵解能力，而对 HK2 KO 细胞无明显作用，提示该效应具有 HK2 依赖性；此外，2.5-20 μM 处理 12-24 h 可剂量依赖性降低缺氧状态下 SW480 细胞的乳酸和 ATP 水平，升高 p-AMPK/AMPK 比值，并调控 Bax/Bcl2 表达，从而诱导生物能量应激和细胞凋亡。