甲氨蝶呤（MTX）单独使用会导致微核双核细胞（MNBN）比例和异常细胞（Abs）比例随浓度增加而升高。随着MTX浓度的增加，核分裂指数（NDI）降低。同样，所有测试浓度下的有丝分裂指数（MI）也会降低。添加50 μg/mL的叶酸钙显著降低了MNBN（40-68%）和Abs（36-77%）的比例。在加入5 μg/mLFolinic acid 的情况下，也观察到抑制效果（MNBN从12%增至54%，Abs从20%增至61%）[2]。

处理小鼠时使用Folinic acid（7.0 mg/kg；腹腔注射；每隔一天；为期3周）似乎能逆转Methotrexate (MTX) 管理在年轻的雄性Balb/c小鼠中引起的生长抑制。众所周知，长期MTX管理会抑制小鼠的骨骼生长[1]。