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Brefeldin A

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Brefeldin A
产品编号 T6062Cas号 20350-15-6
别名 布雷菲德菌素 A, 布雷非德菌素 A, Decumbin, Cyanein, BFA, Ascotoxin

Brefeldin A (Cyanein) 属于大环内酯类抗生素,是一种 ATPase 抑制剂 (IC50=0.2 μM)。Brefeldin A 可以诱导肿瘤细胞分化和凋亡,也具有抑制自噬的活性。

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产品编号 T6062 别名 布雷菲德菌素 A, 布雷非德菌素 A, Decumbin, Cyanein, BFA, AscotoxinCas号 20350-15-6

Brefeldin A (Cyanein) 属于大环内酯类抗生素,是一种 ATPase 抑制剂 (IC50=0.2 μM)。Brefeldin A 可以诱导肿瘤细胞分化和凋亡,也具有抑制自噬的活性。

规格价格库存数量
5 mg
¥ 414
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10 mg
¥ 698
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50 mg
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100 mg
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1 mL x 10 mM (in DMSO)
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实验操作小课堂
Brefeldin A产品问题解答
请问 Brefeldin A 是不是可以处理细胞,抑制分泌蛋白的表达?
可以的,Brefeldin A 阻断分泌蛋白和膜蛋白从内质网向高尔基体的转运。
常见问题解答
如何选择合适的溶剂?
常用的溶剂包括DMSO、水、乙醇等。建议您根据抑制剂给出的溶解度参考,选择合适的溶剂。如果该抑制剂可以溶于DMSO,建议使用没有吸潮新开封的 DMSO,如果有潮气污染,很容易带来抑制剂降解或难溶的问题。如果该抑制剂可以溶于水,建议您根据实验类型选择无菌水、生理盐水、无菌 PBS 、培养基等作为溶剂。
动物实验常用溶解方法?
首先,您需要确认给药剂量、给药方式。对于具体的产品,优先找引用我们产品的文献里的使用方法,再找其他文献里的配方。 如果没有相关的文献,且该化合物的 DMSO 溶解度比较好,我们推荐通用配方: 10% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline/PBS/ddH2O。溶剂依次加入,尽量溶解后再加入下一个溶剂。正常鼠建议 DMSO 浓度在 10% 以下,裸鼠体弱鼠等配方的 DMSO 浓度建议在 2% 以下,根据溶液是否澄清,助溶剂 PEG300、Tween-80 的比例可以适当调整。如果有其他助溶剂也可以使用。 以上配方仅供参考,体内配方并不是绝对的,需要根据不同情况进行调整。建议先取少量化合物测试配方,再进行大量配制。配完也可以再使用超声、加热等方式助溶,看看能不能澄清一点。 腹腔注射对粉末的溶解度要求比较高,建议购买盐形式化合物。如果给药剂量比较大,也有报道使用混悬液进行腹腔给药的。 对于灌胃给药,且剂量比较大的情况下,建议用 0.5% CMC-Na 配置成均匀混悬液进行给药。
化合物如何用于动物实验?如何确立剂量、给药方式等?
同一个化合物对不同动物模型、不同疾病模型的用法不一样,建议根据实验目的,查询文献选择用法。 常见的给药方式包括腹腔注射、灌胃等。由于首过效应,一般可以灌胃的也可以腹腔注射,可以腹腔注射的不一定适合灌胃。不同种属的给药剂量可以根据官网的表格换算。但仅供参考,实际应用中可能未必合适或者准确,尽量以具体某种动物给药剂量的参考文献为主。 我们的化合物都可以进行细胞动物实验,但有些化合物还没有用于动物实验的文献,这种情况下,您可以尝试进行动物实验,但我们无法提供使用方式,也无法保证药效。
抑制剂是否需要灭菌?
如果您使用 DMSO 配制:不建议灭菌,DMSO 本身具有极强的杀菌力,配制好的溶液就是无菌溶液。如果您确实担心的,可以放置 4℃ 冰箱过夜放置即可;依然有顾虑的话,需用有机系专用滤膜过滤。 如果您使用水配制:可以用 0.22 μm 滤膜过滤灭菌。
超声久了会不会对化合物的结构有影响?
建议以较低频率对化合物进行超声,不会对化合物的结构造成影响。
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产品介绍

生物活性
产品描述
Brefeldin A (Cyanein) belongs to the class of macrolide antibiotics and is an ATPase inhibitor (IC50=0.2 μM). Brefeldin A can induce tumor cell differentiation and apoptosis, and also possesses autophagy inhibitory activity.
靶点活性
A549 cells proliferation:101.2 nM, ATPase (HCT 116 cells):0.2 μM, HepG2 cells proliferation:239.1 nM, HeLa cells proliferation:171.9 nM
体外活性
方法:肿瘤细胞 HL60 、K562 和 HT-29 用 Brefeldin A (2 μM) 处理 72 h,使用 DNA filter elution assay 检测 DNA 片段。
结果:Brefeldin A 以不同的动力学诱导 DNA 断裂。HL60 细胞在 15 h 内观察到完整的 DNA 片段,而 K562 和 HT-29 细胞则需要 48-72 h。[1]
方法:人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 用 Brefeldin A (0.05-1 μg/mL) 处理 24 h,使用 Western Blot 方法检测靶点蛋白表达水平。
结果:PARP 切割是细胞死亡的标志性事件,可以在 Brefeldin A 处理的悬浮 MDA-MB-231 细胞中检测到。[2]
体内活性
方法:为检测体内抗肿瘤活性,将 Brefeldin A (15 mg/kg in 10% ricinus oil+5% DMSO+10% ethanol+75% physiologic saline) 腹腔注射给携带人结直肠癌肿瘤 HCT116 的 BALB/c 小鼠,每天一次,持续四周。
结果:Brefeldin A 在体内抑制 HCT116 肿瘤生长。[3]
方法:为检测体内抗肿瘤活性,将 Brefeldin A (16-64 mg/kg in distilled water containing 0.05% Tween 80) 腹腔注射给携带肿瘤 LOX IMVI 的 Athymic NCr nu/nu 小鼠,每天两次,持续五天。
结果:Brefeldin A 在体内显示出抗肿瘤活性,小鼠寿命增加 65%-100%,第 60 天幸存者增加 17%-50%。[4]
激酶实验
ELISA-based active site binding assay: Samples (lysed cells or tissue homogenates) are treated for 1 h at room temperature with the biotinylated active site probe PR-584 (5-15 μM). Samples are denatured by addition of SDS (0.9% final) and heating to 100 °C for 5 min. The denatured samples are transferred to a 96-well or 384-well filter plat, mixed with streptavidin-sepharose beads (2.5-5 μL packed beads/well), and incubated for 1 h at room temperature on a plate shaker. The beads are washed 5 times with 100-200 μL /well of ELISA buffer (PBS, 1% bovine serum albumin, 0.1% Tween-20) by vacuum filtration. The beads are incubated overnight at 4 °C on a plate shaker with the following antibodies recognizing the six catalytic subunits diluted into ELISA buffer: β5, β1, and β2 diluted 1:3000, LMP7 and LMP2 diluted 1:5000, and MECL-1 diluted 1:1000. The beads are washed 5 times with 100-200 μL /well of ELISA buffer and incubated with HRP-conjugated secondary antibody diluted 1:5000 in ELISA buffer and incubated 2 h at room temperature on a plate shaker. The beads are washed 5 times with 100-200 μL /well of ELISA buffer and developed for chemiluminsecence signal using the supersignal ELISA pico substrate following the manufacturer's instructions. Luminescence is measured on a plate reader and converted to ng of proteasome or μg/ml of lysate by comparison with 20S proteasome or untreated cell lysate standard curves. For proteasome inhibitor studies, active site probe binding values are expressed as the percent of binding relative to DMSO treated cells.
细胞实验
HF1A3, HF4.9 cell viability upon the treatments is tested using double staining of cells with YO-PRO 1/PI and SYTO16/PI probes. To access cell proliferation, cells are treated with 0–100 ng/mL Brefeldin A in complete medium for 20 hours before adding 1 μCi/mL [methyl-3H]-thymidine for additional 4 hours at 37 °C. The incorporated radioactive thymidine is quantified by scintillation counting with Microbeta counter. To examine long-term effects of Brefeldin A treatment, cells are seeded at initial concentration 105 cells/mL and treated with 0-75 ng/mL Brefeldin A for up to 5 days. At the time indicated, a sample of cells is removed and viable cell number is assessed by standard Trypan Blue exclusion assay.(Only for Reference)
别名布雷菲德菌素 A, 布雷非德菌素 A, Decumbin, Cyanein, BFA, Ascotoxin
化学信息
分子量280.36
分子式C16H24O4
CAS No.20350-15-6
Smiles[H][C@@]12C[C@H](O)C[C@@]1([H])[C@H](O)\C=C\C(=O)O[C@@H](C)CCC\C=C\2
密度1.108 g/cm3 (Predicted)
储存&溶解度
存储store at low temperature | Powder: -20°C for 3 years | In solvent: -80°C for 1 year | Shipping with blue ice.
溶解度信息
Ethanol: 2.8 mg/mL (9.99 mM), Sonication is recommended.
DMSO: 14 mg/mL (49.94 mM), Sonication is recommended.
溶液配制表
Ethanol/DMSO
1mg5mg10mg50mg
1 mM3.5668 mL17.8342 mL35.6684 mL178.3421 mL
5 mM0.7134 mL3.5668 mL7.1337 mL35.6684 mL
DMSO
1mg5mg10mg50mg
10 mM0.3567 mL1.7834 mL3.5668 mL17.8342 mL
20 mM0.1783 mL0.8917 mL1.7834 mL8.9171 mL

SCI 文献

计算器

  • 摩尔浓度 计算器
  • 稀释 计算器
  • 配液 计算器
  • 分子量 计算器

体内实验配液计算器

请在以下方框中输入您的动物实验信息后点击计算,可以得到母液配置方法和体内配方的制备方法:
TargetMol | Animal experiments比如您的给药剂量是 10 mg/kg ,每只动物体重 20 g ,给药体积 100 μLTargetMol | Animal experiments 一共给药动物 10 只 ,您使用的配方为 5% TargetMol | reagent DMSO+ 30%PEG300+ 5%Tween 80 + 60%Saline/PBS/ddH2O, 那么您的工作液浓度为 2 mg/mL
母液配置方法: 2 mg 药物溶于 50 μLDMSOTargetMol | reagent ( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们联系。
体内配方的制备方法:50μLDMSOTargetMol | reagent 母液,添加 300 μLPEG300TargetMol | reagent 混匀澄清,再加 50μLTween 80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2OTargetMol | reagent 混匀澄清

以上为“体内实验配液计算器”的使用方法举例,并不是具体某个化合物的推荐配制方式,请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。

1 请输入动物实验的基本信息
mg/kg
g
μL
2 请输入动物体内配方组成,不同的产品配方组成不同,如有配方需求,可先联系我们提供正确的体内配方。
% DMSO
%
% Tween 80
% Saline/PBS/ddH2O

剂量转换

对于不同动物的给药剂量换算,您也可以参考 更多

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