BRD4-IN-12 (H5) 在72小时后对HCT-116结直肠癌细胞展现细胞毒性，IC 50 为0.84 μM，并且这种细胞毒性依赖于BRD4。在HCT-116细胞中，BRD4-IN-12 (1.25-5.0 μM; 24 h) 会下调c-MYC、CDK4和BCL-2的蛋白表达，且剂量依赖性地促进p21蛋白表达。BRD4-IN-12 (20 μM；3 h) 在HCT-116细胞裂解液中能够稳定BRD4蛋白，确认其与BRD4的细胞内结合。

BRD4-IN-12 (H5)（25 mg/kg 或 50 mg/kg；口服；每日一次；连续 18 天）在荷 HCT-116 结直肠癌异种移植瘤雄性 BALB/c 裸鼠中分别实现 52% 和 82% 的肿瘤生长抑制率 (TGI)；体重保持稳定，且对主要器官（心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏）无显著病理损伤；同时下调肿瘤组织中 c-MYC 和 BCL-2 表达，并诱导细胞间距增大及细胞核缩小、呈圆形。