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Phosphinothricin N-acetyltransferase Protein, S. viridochromogenes, Recombinant (His)

产品编号 TMPH-03608

Inactivates phosphinothricin (PPT) by transfer of an acetyl group from acetyl CoA. This enzyme is an effector of phosphinothricin tripeptide (PTT or bialaphos) resistance. Phosphinothricin N-acetyltransferase Protein, S. viridochromogenes, Recombinant (His) is expressed in yeast with N-6xHis tag. The predicted molecular weight is 22.6 kDa and the accession number is Q57146.

Phosphinothricin N-acetyltransferase Protein, S. viridochromogenes, Recombinant (His)

Phosphinothricin N-acetyltransferase Protein, S. viridochromogenes, Recombinant (His)

产品编号 TMPH-03608
Inactivates phosphinothricin (PPT) by transfer of an acetyl group from acetyl CoA. This enzyme is an effector of phosphinothricin tripeptide (PTT or bialaphos) resistance. Phosphinothricin N-acetyltransferase Protein, S. viridochromogenes, Recombinant (His) is expressed in yeast with N-6xHis tag. The predicted molecular weight is 22.6 kDa and the accession number is Q57146.
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实验操作小课堂
常见问题解答
细胞实验中,抑制剂如何溶解?
用 DMSO 配置较高浓度母液,母液存于 -80℃,建议多分装几管,一周内使用的存于 4℃,避免反复冻融。实验时用 pbs、生理盐水、培养基、水这些稀释,细胞实验DMSO的终浓度不超过 0.1%。如果超过 0.1%,则需要在做预试验的时候,先进行溶剂阴性对照实验,排除溶剂对细胞的影响。
细胞实验中需要加多少抑制剂?
通常建议您参考同模型实验发表的文献报道;除参考文献报道以外,还需要通过预实验做“剂量-效应曲线”确定最佳作用浓度(浓度梯度);通过“时间-效应曲线”确定最佳孵育时间(处理时间梯度)。另外,抑制剂的使用量受多种因素影响,包括抑制对象的可接触性、细胞通透性、孵育时间、细胞种类等等。我们建议通过检索文献确定使用抑制剂的起始浓度。 如果有报道的 Ki 值或 IC50 值,可以采用其 5-10 倍的量开始尝试以达到抑制酶活性的最佳效果。 如果抑制剂的 Ki 值或 IC50 值未知,则需要在更广泛的范围尝试抑制剂的使用浓度,并采用 Michaelis-Menten 动力学计算 Ki 值。 一般设立溶解抑制剂时所采用的溶剂作为对照,以排除溶剂的非特异性影响。
得到的杀死细胞的 IC50 与网页上 IC50 差距较大怎么办?
您所测试的IC50是指细胞的增殖抑制实验(半抑制率),细胞增殖抑制实验 IC50值,和网页上的靶点IC50其实是不同的意义。文献里和网页上 IC50其实往往是指对于靶点无细胞实验的抑制率,这样的实验一般是通过激酶或者蛋白纯化实验做出来的,nM 级别的浓度比较常见,但是细胞的增殖抑制实验 IC50 是指细胞的半致死率,同时牵涉到细胞的代谢以及渗透,一般浓度会高一些。 另外,同一个化合物对不同细胞模型的效果也是不同的,建议尝试增加孵育量、延长孵育时间。
Tween-20 可以用 Tween-80 替代吗?
不建议使用 Tween-20。相较于 Tween-20,Tween-80 的耐受性更好,Tween-80已被用作评估实验药物和毒物的行为影响的工具,且没有明显的副作用。 参考文献:Castro CA, Hogan JB, Benson KA, Shehata CW, Landauer MR. Behavioral effects of vehicles: DMSO, ethanol, Tween-20, Tween-80, and emulphor-620. Pharmacol Biochem Behav. 1995 Apr;50(4):521-6.
溶解度中写的“< 1 mg/mL refers to the slightly soluble or insoluble ”是什么意思?
这句话指的是,如果溶解度 < 1 mg/mL,那我们就认为它是微溶或不溶的,这是针对写的“DMSO:Insoluble”或“DMSO:slightly soluble”这类化合物的。
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产品信息

生物活性
Activity has not been tested. It is theoretically active, but we cannot guarantee it. If you require protein activity, we recommend choosing the eukaryotic expression version first.
产品描述
Inactivates phosphinothricin (PPT) by transfer of an acetyl group from acetyl CoA. This enzyme is an effector of phosphinothricin tripeptide (PTT or bialaphos) resistance. Phosphinothricin N-acetyltransferase Protein, S. viridochromogenes, Recombinant (His) is expressed in yeast with N-6xHis tag. The predicted molecular weight is 22.6 kDa and the accession number is Q57146.
种属
Streptomyces viridochromogenes
表达系统
P. pastoris (Yeast)
标签N-6xHis
蛋白编号Q57146
别名
PPT N-acetyltransferase,Phosphinothricin-resistance protein,Phosphinothricin N-acetyltransferase,pat
氨基酸序列
MSPERRPVEIRPATAADMAAVCDIVNHYIETSTVNFRTEPQTPQEWIDDLERLQDRYPWLVAEVEGVVAGIAYAGPWKARNAYDWTVESTVYVSHRHQRLGLGSTLYTHLLKSMEAQGFKSVVAVIGLPNDPSVRLHEALGYTARGTLRAAGYKHGGWHDVGFWQRDFELPAPPRPVRPVTQI
蛋白构建
1-183 aa
蛋白纯度
> 90% as determined by SDS-PAGE.
分子量22.6 kDa (predicted)
内毒素< 1.0 EU/μg of the protein as determined by the LAL method.
缓冲液Tris-based buffer, 50% glycerol
复溶方法
A Certificate of Analysis (CoA) containing reconstitution instructions is included with the products. Please refer to the CoA for detailed information.
存储
Lyophilized powders can be stably stored for over 12 months, while liquid products can be stored for 6-12 months at -80°C. For reconstituted protein solutions, the solution can be stored at -20°C to -80°C for at least 3 months. Please avoid multiple freeze-thaw cycles and store products in aliquots.
运输方式In general, Lyophilized powders are shipping with blue ice. Solutions are shipping with dry ice.
研究背景
Inactivates phosphinothricin (PPT) by transfer of an acetyl group from acetyl CoA. This enzyme is an effector of phosphinothricin tripeptide (PTT or bialaphos) resistance.

SCI 文献

计算器

  • 复溶 计算器
  • 重组蛋白稀释 计算器
  • 比活力 计算器

技术支持

请阅读 重组蛋白用户指南 了解更多具体信息.