TS Assay Kit (Microanalysis)

TS 催化麦芽糖产生海藻糖，使用糖化酶分解剩余麦芽糖为葡萄糖，通过葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量，按照麦芽糖减少的量表示海藻糖合酶活性。

100T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、研钵、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸馏水。

二、样品处理：
1.细菌或细胞的处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴ 个）：CB0237M-ES体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL CB0237M-ES），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3S，间隔 10S，重复30 次）；8000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2.组织的处理：按照组织质量（g）：CB0237M-ES体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，加入 1mL CB0237M-ES），冰浴中匀浆。8000g ，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。
2.工作液配制：临用前将CB0237M-C和CB0237V-D按照 1:1 的比例混合，用多少配多少。
3.将30 mmol/mL的标准液用蒸馏水倍比稀释为6、5、4、3、2、1、0.5 mmol/mL 的标准溶液备用。
4.加样表（在EP管中依次加入下列试剂）：

四、TS酶活性计算公式：
1.标准曲线的绘制：
根据标准管的浓度(x，mg/mL)和吸光度ΔA标(y，ΔA标)，建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测(y， ΔA测)带入公式计算样本浓度(x，mg/mL)。
2.酶活性计算：
(1)按照蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化 1nmol 麦芽糖产生 1nmol 海藻糖定义为一个酶活力单位。
TS 活力 (U/mg prot) = x×V反总÷(V样×Cpr) ÷T×1000 ÷2=12.5x÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义：每 g 组织每分钟催化 1nmol 麦芽糖产生 1nmol 海藻糖定义为一个酶活力单位。
TS 活力 (U/g 鲜重) = x×V反总÷(W×V样÷V样总) ÷T×1000÷2=12.5x÷W
(3)按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化 1nmol 麦芽糖产生 1nmol 海藻糖定义为一个酶活力单位。
TS 活力 (U/10⁴ cell) = x×V反总÷(500×V样÷V样总) ÷T×1000÷2=0.025x÷W
注：V样：加入样本体积：0.1mL；V样总：加入CB0237M-ES体积，1 mL；V反总：反应体系总体积，0.3mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万；T：反应时间，120min；1000，μmol 到 nmol 转换系数；2，1 分子麦芽糖转化为 2 分子葡萄糖。

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。