Tannin Assay Kit (Spectrophotometry)

单宁在碱性环境下与磷钼酸反应，生成蓝色化合物，在760nm处有最大吸收峰。

50T/48S规格的产品组成及保存条件： 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

二、单宁的提取：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水），充分匀浆后转移到EP管中，80℃水浴提取30min， 8000 g，25℃离心10 min，取上清液待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至760nm处，蒸馏水调零；CB0208S-A和CB0208S-B 37℃预热10min以上；
2.标准液的稀释：将标准液用蒸馏水稀释为0.5、0.3、0.1、0.075、0.05、0.025mg/mL标准溶液。
3.操作表：

四、单宁含量计算：
1.标准曲线的绘制： 根据标准管的浓度(y，mg/mL)和吸光度ΔA标准(x，ΔA标准)，建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定(x，ΔA测定)带入公式计算样本浓度(y，mg/mL)。
2.单宁含量计算：
(1)按蛋白浓度计算 单宁含量(nmol/mg prot)=y×V提取÷(V提取×Cpr) =y÷Cpr
(2)按样本质量计算 单宁含量(nmol/g 质量)=y×V提取÷W =y÷W
Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V提取：提取液体积，1mL。

1.若 A2-A1 大于 0.5，需将酶液用提取液稀释，使 A2-A1 小于 0.5，可提高检测灵敏度，并在计算公式中乘以相应稀释倍数。
2.若 A2-A1 小于 0.005，可延长反应时间到 5min 或 10min。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。