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Superoxide dismutase Assay Kit (Spectrophotometry)

Superoxide dismutase Assay Kit (Spectrophotometry)

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Superoxide dismutase Assay Kit (Spectrophotometry)
产品编号 CB0114S
别名 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒(分光光度法)
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD; EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可以催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。
规格价格库存数量
50 T
¥ 462
4-6日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-.),O2-.可还原羟胺生成亚硝酸盐,在显色剂的作用下呈现紫红色,在 550nm 处有吸收;SOD 可清除 O2-.,从而减少亚硝酸盐的形成;反应液颜色越深,说明 SOD 活性愈低,反之活性越高。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

50T/48S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0114S-A 60mL×1 4℃保存;
CB0114S-B 5mL×1 4℃保存;
CB0114S-C 30mL×1 4℃保存;
CB0114S-D 100μL×1 -20℃保存;
CB0114S-E 100mL×1 4℃避光保存;
CB0114S-F 100mL×1 4℃避光保存。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计或酶标仪、离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、水浴锅、研钵、冰、蒸馏水。

二、试剂配制:
CB0114S-D应用液:用时按CB0114S-D:CB0114S-A=1:60比例配制,按量配制。样本处理:
1.血清(浆)、细胞培养液等液体样品:直接检测。
2.组织样品的制备:
动物组织:按照组织质量(g):生理盐水(mL)为 1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质,冰浴条件下制备成匀浆液,2500-3000转/分钟,离心10min,取上清待测。
植物组织:按照组织质量(g):0.1mol/L PBS(mL)为1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质,冰浴条件下制备成匀浆液,3500-4000转/分钟,离心10min,取上清待测。

三、测定步骤:
1.分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 550nm。
2.在 EP 管中依次加入下列试剂:

试剂名称 测定管 (mL) 对照管 (mL)
CB0114S-A 1.0 1.0
样本 0.01
蒸馏水 0.01
CB0114S-B 0.1 0.1
CB0114S-C 0.1 0.6
CB0114S-D应用液 0.1 0.1
充分混匀,置37℃水浴30min
CB0114S-E 2 2
CB0114S-F 2 2
充分混匀,室温放置15min,于550 nm 处测定各管吸光值 A

四、SOD酶活力计算:
1.抑制率的计算:
抑制率 = (A对照管-A测定管) ÷A对照管
尽量使样本的抑制率在0.15-0.60范围内。如果计算出来的抑制率不在此范围,则通常需要调整加样量后重新测定。如果测定出来的抑制率偏高,则需将样本用提取液适当稀释;如果测定出来的抑制率偏低,则需重新准备浓度比较高的待测样本。
2.SOD 酶活性计算:
(1)血清(浆)、细胞培养液等液体样品SOD 活力计算:
SOD酶活性定义:每毫升反应液中SOD抑制百分率为 50%时所对应的SOD量为一个SOD活力单位(U)。
SOD 活性(U/mL) = 抑制率÷50%×样本稀释倍数×反应体系总体积÷样本检测量
(2)组织 SOD 活力计算:
SOD酶活性定义:每毫克组织蛋白在1ml反应液中SOD抑制率为 50%时所对应的SOD量为一个SOD活力单位(U)。
SOD 活性(U/mg) = 抑制率÷50%×反应体系总体积÷样本检测量÷样本蛋白浓度(mg/mL)

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。