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Soil-AI Assay Kit (Spectrophotometry)

Soil-AI Assay Kit (Spectrophotometry)

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Soil-AI Assay Kit (Spectrophotometry)
产品编号 CB0255S
别名 土壤酸性转化酶活性检测试剂盒(分光光度法)
土壤酸性转化酶(Solid-Acid invertase, S-AI)在pH 为4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。
规格价格库存数量
50 T
¥ 748
10-12日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

S-AI催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在520nm有特征光吸收,在一定范围内520nm光吸收增加速率与AI活性成正比。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

50T/24S规格的产品组成及保存条件: 

编号 规格 储存条件
CB0255S-A 100mL×1瓶 4℃保存;
CB0255S-B 粉剂×2 瓶 4℃保存;临用前加入25mL CB0255S-A充分溶解备用;剩余试剂4℃保存;
CB0255S-C 30mL×1瓶 4℃保存;
CB0255S-Standard 粉剂×1 支 4℃保存;临用前加入 1 mLAK435-A充分溶解,制备 10 mg/mL标准溶液待用,4℃可保存两周。

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

二、粗酶液提取:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

三、测定步骤:
1.分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至520nm,蒸馏水调零。
2.标准品的制备:将标准品用蒸馏水稀释至1.5、1.2、1、0.8、0.5、0.2、0mg/mL(0mg/mL为空白管)。
3.样本测定,(在EP 管中依次加入下列试剂):

试剂名称 对照管(μL) 测定管(μL) 标准管(μL) 空白管(μL)
风干土样 0.1g 0.1g
CB0255S-A 800 800
CB0255S-B 800
标准溶液 800
甲苯 20 20 20 20
混匀,37℃准确水浴30min,95℃水浴10min左右(盖紧,以防水分散失),流水冷却,充分混匀(以保证浓度不变),10000g 25℃离心10min,取上清液
上清液 700 700 700 700
CB0255S-C 300 300 300 300
混匀,95℃水浴10min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀, 520nm处,蒸馏水调零,记录各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数),分别记为 A对照管,A测定管,A标准管,A空白管。计算 ΔA=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管需设一个对照管(标准曲线只需检测 1-2 次)。每个测定管需要设一个对照管。

四、S-AI 活性计算:
1.标准曲线的建立: 以各浓度下吸光值减空白管(浓度为0mg/mL)的吸光度为y轴,葡萄糖浓度为x轴绘制标准曲线。根据标准曲线,将ΔA带入方程得到x(mg/mL)。
2.S-AI活力计算:
单位定义:每天每g土样中产生1mg还原糖定义为一个S-AI活力单位。
S-AI活力 (mg/d/g土样) = x×V反总÷W÷T= 192x
注:V反总:反应体系总体积:0.8mL;T:反应时间,1/48d; W:样本质量,0.1g。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。