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SL Assay Kit (Microanalysis)

SL Assay Kit (Microanalysis)

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SL Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0262M
别名 土壤漆酶活性检测试剂盒(微量法)
漆酶(Soil Laccase,SL)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,555
10-12日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0262M-A 40mL×1瓶 4℃保存;
CB0262M-B 粉剂×2瓶 保存,临用前每瓶加10mL CB0262M-A溶解。

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、天平、低温离心机、震荡仪。

二、样本处理
新鲜土样风干,过30-50目筛。

三、测定步骤:
1.分光光度计预热30min,调节波长到420nm,蒸馏水调零。
2.样本测定,(在EP 管中依次加入下列试剂):

对照管 测定管
样本(g) 0.02 0.02
CB0262M-A(μL) 250
工作液(μL) 250
37℃震荡反应10min,冰浴5min,10000g,4℃离心5min,分别取上清200μL于420nm处测定吸光值,记为记为A对照和A测定。ΔA=A测定-A对照

四、酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol底物ABTS所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
SL活性 (nmol/min/g 土样) = ΔA÷(ε×d)×V反总÷W÷T = 0.694×ΔA÷W
注:ε:ABTS毫摩尔消光系数:36L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.25mL;W:样本质量,g;T:反应时间,10min。

b. 用96孔板测定的计算公式如下
酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol底物ABTS所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
SL活性 (nmol/min/g 土样) = ΔA÷(ε×d)×V反总÷W÷T =1.388×ΔA÷W
注:ε:ABTS毫摩尔消光系数:36L/mmol/cm;d:比色皿光径,0.5cm;V反总:反应总体积,0.25mL;W:样本质量,g;T:反应时间,10min。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.工作液需临用前配制,并且尽快使用,4℃保存一周,若变色则不能使用。
2.测定之前进行预实验,若吸光值较高,请将样品用提取液进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
3.反应完立即记录数据,以免造成逆向反应影响实验结果。
4.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。