Plant Total Phenol Assay Kit (Microanalysis)

在碱性条件下，酚类物质将钨钼酸还原，产生蓝色化合物，在 760nm 处有特征吸收峰，测760nm 处的吸光值，即可得样品总酚含量。

100T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、水浴锅、天平、烘箱、可调式移液枪和双蒸水等。

二、样品的制备：
将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约 0.1g，加入2.5mL 提取液，用超声提取法进行提取，超声功率 300W，破碎 5s，间歇 8s，60℃，提取 30min。10000g，25℃，离心 10min，取上清，用提取液定容至2.5mL，待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 760nm，蒸馏水调零。
2.标准液的制备：临用前加入 1mL 蒸馏水，50℃加热溶解，配制成 5mg/mL 的标准溶液，再用蒸馏水稀释至0.1562、0.0781、0.0391、0.0195、0.0098、0.0049、0 mg/mL，待测。
3.在微量玻璃比色皿/96 孔板中按列表中顺序加入上述试剂：

四、总酚含量计算公式：
1.标准曲线绘制：以不同浓度的标准品为x轴 ，以A标准为y轴绘制标准曲线y= kx+b。
2.植物总酚含量计算：将ΔA=A测定-A对照，带入标准曲线，求x(mg/mL)。
(1)按样本质量计算
总酚含量(mg/g 质量)=x×V提取÷W=2.5x÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
总酚含量(mg/mg prot)=x×V提取÷(V提取×Cpr)=x ÷Cpr
V提取：加入提取液体积，2.5mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。

1.若样本吸光值不在测定线性范围内，建议稀释或者增加样本量再进行测定。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。