Plant ammonium nitrogen Assay Kit (Visible Spectrophotometry)

α-氨基酸与水合茚三酮溶液一起加热，经氧化脱氨变成相应的α-酮酸，酮酸进一步脱羧变成醛，水合茚三酮则被还原，在弱酸环境中，还原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反应，缩合生成蓝紫色物质，在580nm处有特征吸收峰。

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、天平、研钵、常温离心机、恒温水浴锅。

二、粗酶液提取：
按照质量（g）：CB0223V-ES体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL CB0223V-ES）加入CB0223V-ES，室温匀浆后12000g离心10min，取上清待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热 30min，调节波长至 580nm，蒸馏水调零
2.标准稀释液的制备：将10 mg/mL氮标准液使用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL即为标准稀释液。
3.样品测定（在EP管中加入下列试剂）：

四、计算公式：
1.标准曲线的绘制：
根据标准管的浓度(x，mg/mL)和吸光度ΔA标准(y，ΔA标准)，建立标准曲线；然后根据标准曲线，将ΔA测定(y，ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x，mg/mL)。
2.NH₄⁺ -N含量计算：
NH₄⁺ -N含量(mg/g 鲜重)=x×V提取÷W=x÷W
注：V提取：提取液体积，1mL；W：样本质量，g。

1.提取好的待测液尽快测定，低温保存不得超过24小时。
2.沸水浴时间不宜过长，否则会对测定结果有影响。
3.显色后20min内完成测定。
4.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。