常见问题解答问Cocktail 系列的使用方法?
答在室温下解冻,开盖前请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。然后在实验前以 1:100(v/v)稀释至溶液样品(细胞裂解液或组织提取液)。
问使用 CCK8 进行实验后,发现读值低,不变色、没差异等,应该怎么办?
答CCK8 在孵育 1-4 小时后,OD 读值在 1-2 之间为佳,线性关系比较好。关于 CCK8 的使用问题,通常建议调整细胞状态、增加种板数量、改变加药浓度、延长孵育时间等。
问在做加药实验时,药物对 CCK8 测定是否有影响?如何解决?
答有时会有影响。如果药物具有还原性,会和 CCK-8 发生显色反应,增加吸光度。解决办法:首先要确认药物是否有吸收,在含有药物的培养基中加入 CCK-8,测定 450 nm 的吸光度,如果它的吸光度比不含药物的培养基 (加 CCK-8)的吸光度高,则证明药物有影响,可在加 CCK-8 之前更换培养基,去掉药物的影响。
问三种磷酸酶抑制剂cocktail的区别
答成分功能均不一样,具体信息可在官网进行查询。用哪个需要根据老师的实验需求确定。C0002的抑制范围会相对C0003广泛一点,如果只想买一支又不确定哪个合适的话,推荐C0002。如果想要更全面的抑制,推荐C0004。
问三款 RIPA 裂解液有什么区别?
答RIPA 裂解液(强)、RIPA 裂解液(中)、RIPA 裂解液(弱)的有效裂解成分、裂解强度不同,建议查询官网,有三款RIPA裂解液的比较表。