Oil Red O Staining Solution

1. 脂滴标记特异性强。
2. 操作简便。
3. 显色清晰。
4. 性价比高。

脂肪细胞分化实验、肝细胞脂质代谢模型、免疫细胞脂质吞噬实验、动脉粥样硬化斑块检测。

将油红O染色储备液与ddH2O按3:2的体积比稀释，用0.45 µm滤膜过滤，配制成染色工作液，配好的工作液为酒红色且无沉淀。工作液应现配现用，避免长时间放置出现沉淀。

1. 贴壁细胞染色：
   （1）吸除细胞培养基，用PBS洗涤1次，加入适量的4%多聚甲醛溶液或10%甲醛溶液固定10 min。
   （2）弃去固定液，用PBS洗涤2次，加入60%异丙醇浸洗20-30 s。
   （3）弃去60%异丙醇，加入新配制好的油红O染色工作液，浸染10-20 min。
   （4）弃去染色液，加60%异丙醇漂洗10-20 s至间质清晰。用ddH2O洗涤2-5次，直到无多余染液脱出。
   （5）加入苏木素染液，复染核1-3 min，弃去染液后用细水流冲洗（操作时避免水流直接冲洗细胞）。
   （6）加入ddH2O覆盖住细胞，将细胞转移至显微镜下观察并拍照。
2. 细胞涂片染色：
   （1）制备新鲜骨髓、血液涂片，使涂片在室温下自然晾干。滴加4%多聚甲醛固定10-15 min，再用ddH2O漂洗2次。
   （2）加入新配制好的油红O染色工作液，染色10-20 min。
   （3）去除染色液，加入60%异丙醇漂洗10-20 s，再用ddH2O洗涤2-5次。
   （4）滴加苏木素染色液，复染核1-3 min，弃去染液后用细水流冲洗（操作时避免水流直接冲洗细胞）。
   （5）用水性封片液封片（选做），将涂片转移至显微镜下观察并拍照。

室温避光保存，一年有效。

1. 油红O染色时间并非固定，具体实验时间应根据实验需要进行调整。
2. 油红O溶液是饱和溶液，室温或4ºC保存时，可能会有少量沉析出或瓶壁有少量不溶物粘附，不影响使用。
3. 油红O染色时，应避免染色工作液挥发，否则染色工作液可能会形成沉淀而产生背景。
4. 用于油红O染色的冰冻切片要适当厚一些，一般为10-15 µm，切片太薄容易导致脂肪流失。
5. 油红O染色结果不能长期保存，染色完毕后应尽快观察拍照。
6. 本品仅适用于专业科研用途，严禁用于临床诊断、治疗、食品或药品领域，且不得存放于住宅等非专业场所。
7. 为保障操作安全与人员健康，操作时请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。