LA Assay Kit (Microanalysis)

Name: LA Assay Kit (Microanalysis)
Brand: TargetMol
SKU: CB0243M
Rating: 5 (4 reviews)

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产品编号 CB0243M

别名 乳酸含量检测试剂盒（微量法）

乳酸（lactic acid，LA）是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关，乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。

规格	价格	库存	数量
100 T	¥ 1,598	10-12日内发货

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实验操作小课堂

常见问题解答

检测原理

以 NAD⁺为氢受体，LDH 催化乳酸(Lactic Acid)脱氢产生丙酮酸，使 NAD⁺转化成 NADH。其中 PMS 递氢使 NBT 还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在 530nm 时与乳酸含量成线性关系。

产品规格

100T/96S规格的产品组成及保存条件：微量法

编号	规格	储存条件
CB0243M-A	60mL×1 瓶	4℃保存；
CB0243M-B	0.6mL×1 支	4℃保存；
酶工作液配制：临用前将试剂B和试剂A按照1：100 的体积比进行混合，现用现配，4℃保存24小时内有效。
CB0243M-C	6mL×2 支	4℃避光保存；
CB0243M-D	粉剂×2 瓶	短期（1 个月内）使用可放 4℃冰箱，长期存放请置-20℃以下。(注:粉剂量较少, 可能附着于管壁或盖子上,并非空管,如使用时肉眼不可见,可将其 4000 转/ 分钟离心 2 分钟后使用)；
CB0243M-E	60mL×2 瓶	4℃保存；
CB0243M-S	2mL×1 支	4℃保存；
显色液配制：取 1 瓶试剂 C，转移 1mL 进入一支试剂 D 粉剂中, 反复颠倒离心管混匀,待粉剂溶解后，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，再从这瓶试剂 C 中移出 1mL 到原试剂 D 离心管中，如此反复 2～3 次，使二者充分混合溶解，配成显色剂，4℃避光保存 2 周内有效。

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、天平、研钵、离心机、恒温水浴锅。

二、样本的前处理：
1.组织：组织样本准确称取组织重量，按重量（g）:体积（mL）=1:9 的比例加入 9 倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液（10%匀浆上清液）进行测定。取 10%匀浆上清液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择测定绝对 OD（测定 OD-空白 OD）在 0.05～0.35 之间的浓度为最佳取样浓度（如果测定绝对 OD 小于 0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对 OD 大于 0.35，则需要将样本稀释后重新测定）。
2.血清（浆）培养液：取血清（浆）、培养液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择测定绝对 OD（测定 OD-空白 OD）在 0.05～0.35 之间的浓度为最佳取样浓度（如果测定绝对 OD 小于 0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对 OD 大于 0.35，则需要将样本稀释后重新测定）。

三、测定步骤：
1.分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 530nm。
2.样本测定（在 EP 管中加入下列试剂）：

试剂名称	空白管	标准管	测定管
蒸馏水（mL）	0.01
3mmol/L 标准品（mL）		0.01
样本（mL）			0.01
酶工作液（mL）	0.5	0.5	0.5
显色剂（mL）	0.1	0.1	0.1
混匀，37℃水浴准确反应 10 分钟
终止液（mL）	1	1	1
混匀，吸取 200μL 到微量比色皿或 96 孔板中，测定波长 530 nm 处吸光值，测各管吸光值 A，即为 A空白、A标准、A测定；计算ΔA 样= A测定-A空白，ΔA 标= A标准- A空白。

四、乳酸含量计算公式
1.按照蛋白含量计算
LA 含量 (μmol/mg prot) = ΔA 样÷ΔA 标×C 标÷ Cpr = 3×ΔA 样÷ΔA 标÷Cpr
2.按照液体体积计算
LA 含量 (μmol/mL) = ΔA 样÷ΔA 标×C 标×N = 3×ΔA 样÷ΔA 标×N
注：C 标：标准品浓度，3mmol/L ；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；N：样本测试前稀释倍数。
蛋白定量检测建议使用本公司：BCA Protein Assay Kit )

注意事项
1.血清、血浆、组织块置于冰箱-20℃冷冻，可保存 1 个月左右；-70℃冷冻可保存 2～3 个月，温度越低保存时间越长；解冻后的样本或组织匀浆必须当天测定。
2.在批量实验前需要进行预实验，以确定测定绝对 OD(测定 OD 值-空白 OD 值)在 0.05～0.35 之间。如果测定绝对
OD 小于 0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对 OD 大于 0.35，则需要将样本稀释后重新测定。

注意事项

1.血清、血浆、组织块置于冰箱-20℃冷冻，可保存 1 个月左右；-70℃冷冻可保存 2～3 个月，温度越低保存时间越长；解冻后的样本或组织匀浆必须当天测定。
2.在批量实验前需要进行预实验，以确定测定绝对 OD(测定 OD 值-空白 OD 值)在 0.05～0.35 之间。如果测定绝对
OD 小于 0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对 OD 大于 0.35，则需要将样本稀释后重新测定。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。