1. 小鼠细胞

2. 人源细胞

1. 效果好：去除率可达99%以上。
2. 易操作：无需分离柱。
3. 速度快：只需30 min即可完成CD3+细胞的去除。

• 适用于从人PBMC或WBC中去除CD3+细胞。

从人PBMC或WBC中去除CD3+ 细胞：

1. 获得人PBMC或人WBC后计数，将细胞重悬于450 μL分选缓冲液中，并调整细胞浓度至1×10^8个细胞/mL。
   注：分选缓冲液推荐配方：PBS，含有2 mM EDTA和2% FBS；或PBS，2 mM EDTA和0.5% BSA。缓冲液需预先经0.22 μm滤膜过滤灭菌。
2. 磁珠预处理：涡旋振荡重悬磁珠，将所需量的磁珠移至1.5 mL离心管中，加入1 mL分选缓冲液，10000 g离心1 min，弃去上清。重复以上洗涤步骤一次。加入与原体积相同的分选缓冲液重悬磁珠。若使用50 μL磁珠进行清洗，则清洗后用50 μL分选缓冲液重悬。
3. 将450 μL的细胞悬液（含1×10^8个细胞）加入无菌流式管底部，在流式管中加入50 μL经过预处理的磁珠，混合均匀，室温下旋转孵育30 min。
   注：细胞加入流式管底部时，避免沿管壁添加。根据磁力架的不同，也可使用离心管进行细胞分选。若分选的细胞数量较多，磁珠的用量需按比例增加。例如，分选1.5×10^8个细胞时，在1.5 mL离心管中加入675 μL细胞悬液和75 μL磁珠。若分选的细胞少于5×10^7个，则应将细胞悬液体积补至225 μL，并加入25 μL磁珠。
4. 孵育结束后，在流式管中加入分选缓冲液将液体体积补至3 mL，用移液器轻轻吹打混匀10次，避免剧烈振荡或上下颠倒混匀。
5. 将装有细胞的流式管置于磁力架上静置5 min。
6. 上清液中含有目的细胞，将细胞悬液轻轻倒入无菌离心管中，倒出过程中流式管保持在磁力架上。500 g离心5 min，弃去上清，收集细胞。
7. 根据实验要求洗涤细胞后，将其重悬于所需的缓冲液或培养基中，便可用于后续的分子生物学或细胞生物学实验。

4℃，2年。

1. 避免冷冻试剂盒各组分。磁珠应保存在储存溶液中，防止干燥。
2. 在从磁珠保存管中取出磁珠之前，应充分震荡以确保均匀悬浮。操作过程中注意避免产生气泡。
3. 建议使用质量较好的移液器吸头和反应管，以避免因磁珠和溶液附着而造成损失。
4. 本品用于细胞富集后无法解离，得到的CD3+细胞有抗体和磁珠标记，适合直接裂解进行检测。
5. 推荐使用磁场强度大于7000Gs的磁力架，磁性过低可能影响分选效果。
6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。