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| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 50 T | ¥ 572 | 4-6日内发货 |
利用专用提取液提取,然后用显色剂进行显色,显色后在 570nm 下进行测定。
50T/48S规格的产品组成如下:
| 组成 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0085S-ES | 60mL×1瓶 | 4℃保存。 |
| CB0085S-A | 粉剂×1支 | 4℃保存;临用前加入 10mL 蒸馏水,充分混匀溶解,剩余试剂需4℃保存。 |
| CB0085S-Standard | 粉剂×1支 | 4℃保存;临用前加入 1mL 蒸馏水溶解配制成 12.5μmol/mL的标准溶液。 |
一、自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、1mL玻璃比色皿、水浴锅、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水。
二、谷氨酸提取:
1.组织样品:按照组织质量(g):提取液CB0085S-ES体积(mL)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL CB0085S-ES),进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2.血清(浆)或细胞培养液样品:按照血清(浆)或细胞培养液体积(mL):提取液CB0085S-ES体积 (mL)为 1:1 的比例(建议取 0.5mL 血清(浆)或者细胞培养液加入0.5mL CB0085S-ES),进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
三、测定操作:
1.可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 570nm。
2.将12.5 µmol/mL的标准液用蒸馏水稀释为 5µmol/mL 的标准溶液备用。
3.在EP管中按表加入下列试剂:
| 试剂名称 | 测定管 (μL) | 对照管 (μL) | 标准管 (μL) | 空白管 (μL) |
|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1000 | |||
| 标准溶液 | 1000 | |||
| 蒸馏水 | 1000 | |||
| CB0085S-ES | 1000 | |||
| CB0085S-A | 200 | 200 | 200 | 200 |
| 混匀,90℃水浴 20min(盖紧,以防水分散失),流水冷却,取1mL至比色皿中,于 570nm 波长处记录吸光值A,分别记为A 对照管、A 测定管、A 空白管和A 标准管。计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。 | ||||
四、谷氨酸含量计算:
1.按蛋白浓度计算:
谷氨酸含量 (µmol/g prot) = ΔA 测定÷ΔA 标准×C标准÷Cpr×F =5×ΔA 测定÷ΔA 标准÷Cpr×F
2.按样本质量计算:
谷氨酸含量 (µmol/g 鲜重) =ΔA 测定÷ΔA 标准×C标准÷W×F =5×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×F
3.按液体体积计算:
谷氨酸含量(μmol /mL)=ΔA 测定÷ΔA 标准×C标准×2×F=10×ΔA 测定÷ΔA 标准×F
注:C 标准:标准管浓度,5μmol/mL;W:样本质量,g;F:样本稀释倍数;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;2:液体样本前处理的稀释倍数。
1.为提高检测灵敏度,测定管的吸光值应小于 1,若大于 1 则需要将上清液用提取液CB0085S-ES稀释至适当倍数后测定,计算公式中乘以相应稀释倍数。
2.蛋白定量测定,建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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