Glucose Assay Kit (Spectrophotometry)

葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在 505nm 有特征吸收峰，强度与原始葡萄糖浓度成正比。

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、水浴锅、天平、离心机、可调式移液枪、蒸馏水。

二、一．葡萄糖提取：
1.组织的处理：按照组织质量（g）：蒸馏水体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 蒸馏水），研磨成匀浆，沸水浴中煮沸 10 分钟（盖紧，防止水分散失），冷却后，8000g，常温离心 10min，取上清液备用。
2.细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：蒸馏水体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 蒸馏水），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3S，间隔 10S，重复 30 次），沸水浴中煮沸 10 分钟（盖紧，防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心 10min，取上清液备用。
3.血清（浆）：直接测定。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 505nm，蒸馏水调零。
2.工作液的配制：使用前将CB0082S-B和CB0082S-C等体积混合，用多少配多少。
3.在1.5ml离心管中加入下列试剂：

四、葡萄糖/血糖含量计算：
1.按样本蛋白浓度计算
葡萄糖含量(μmol/mg prot) = (C标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)=2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷Cpr
2.按样本鲜重计算
葡萄糖含量 (μmol/g 鲜重) = (C标×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
3.按细菌或细胞密度计算
葡萄糖含量 (μmol/ 10⁴ cell) = (C标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(500×V1÷V2) = 0.004×(A3-A1)÷(A2-A1)
4.血糖含量 (μmol/mL) = C 标准×(A3-A1)÷(A2-A1) = 2×(A3-A1)÷(A2-A1)
C标准：标准管浓度，2µmol/mL；V1：加入样本体积，100µL=0.1mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；500：细菌或细胞总数，500 万。

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。