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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
100 T | ¥ 1,944 | 4-6日内发货 |
FCR催化Fe3+还原为Fe2+,Fe2+和ferrozine反应显色,在562nm下有特征吸光值。
100T/96S规格的产品组成如下:
组成 | 规格 | 储存条件 |
CB0073M-A | 6mL×1瓶 | 4℃避光保存 |
CB0073M-B | 6mL×1瓶 | 4℃避光保存 |
CB0073M-C | 6mL×1瓶 | 4℃保存 |
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
二、粗酶液提取:
按照组织质量(g):水(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL蒸馏水),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
三、测定步骤:
试剂名称 | 测定管 (μL) |
样本 | 50 |
工作液 | 150 |
混匀,记录初始吸光值A1和30min后的吸光值A2。ΔA=A2-A1。 |
四、FCR活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 8.0014x + 0.0011,R2 = 0.9997。
单位定义:每g样本每分钟产生1nmol Fe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR (U/g 鲜重) = (△A-0.0011)÷ 8.0014×1000×V标÷(V 样÷V 样总×W)÷T = 4.166×(△A-0.0011)÷W
2. 按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每mg蛋白每分钟产生1nmol Fe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR (U/mg prot) =( △A-0.0011)÷8.0014×1000×V标÷(V 样÷V 样总×Cpr)÷T = 4.166×(△A-0.0011)÷Cpr
注:V 样总:加入提取液体积,1 mL;V 样:反应中样品体积,50μL;V标:加入标准品体积 ,50μL;T:反应时间,30min;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;1000,μmol到nmol的转换系数。
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 4.0007x + 0.0011,R2 = 0.9997;y,吸光度。
单位定义:每g样本每分钟产生1nmol Fe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR (U/g 鲜重) = (△A-0.0011)÷4.0007×1000×V标÷(V 样÷V 样总×W)÷T = 8.331×(△A-0.0011)÷W
2. 按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每mg蛋白每分钟产生1nmol Fe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR (U/mg prot) = (△A-0.0011)÷4.0007×1000×V标÷(V 样÷V 样总×W)÷T = 8.331×(△A-0.0011)÷Cpr
注:V 样总:加入提取液体积,1 mL;V 样:反应中样品体积,50μL;V标:加入标准品体积 ,50μL;T:反应时间,30min;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;1000,μmol到nmol的转换系数。
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