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FCR Assay Kit (Microanalysis)

FCR Assay Kit (Microanalysis)

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FCR Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0073M
别名 高铁还原酶活性检测试剂盒(微量法)
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,944
4-6日内发货
大包装 & 定制
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TargetMol 的所有产品仅用作科学研究或药证申报,不能被用于人体,我们不向个人提供产品和服务。请您遵守承诺用途,不得违反法律法规规定用于任何其他用途。
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

FCR催化Fe3+还原为Fe2+,Fe2+和ferrozine反应显色,在562nm下有特征吸光值。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

100T/96S规格的产品组成如下:

组成 规格 储存条件
CB0073M-A 6mL×1瓶 4℃避光保存
CB0073M-B 6mL×1瓶 4℃避光保存
CB0073M-C 6mL×1瓶 4℃保存

注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
二、粗酶液提取:
按照组织质量(g):水(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL蒸馏水),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
三、测定步骤:

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至562nm,蒸馏水调零。
  2. 工作液配制:将CB0073M-A:B:C以1:1:1的比例混合。临用前配制,用多少配多少。
  3. 样本测定:在微量石英比色皿/96孔板中加入下列试剂:
试剂名称 测定管 (μL)
样本 50
工作液 150
混匀,记录初始吸光值A1和30min后的吸光值A2。ΔA=A2-A1。

四、FCR活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 8.0014x + 0.0011,R2 = 0.9997。

  1. 按样本质量计算:

单位定义:每g样本每分钟产生1nmol Fe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR (U/g 鲜重) = (△A-0.0011)÷ 8.0014×1000×V标÷(V 样÷V 样总×W)÷T = 4.166×(△A-0.0011)÷W
2. 按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每mg蛋白每分钟产生1nmol Fe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR (U/mg prot) =( △A-0.0011)÷8.0014×1000×V标÷(V 样÷V 样总×Cpr)÷T = 4.166×(△A-0.0011)÷Cpr
注:V 样总:加入提取液体积,1 mL;V 样:反应中样品体积,50μL;V标:加入标准品体积 ,50μL;T:反应时间,30min;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;1000,μmol到nmol的转换系数。
b. 用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 4.0007x + 0.0011,R2 = 0.9997;y,吸光度。

  1. 按样本质量计算:

单位定义:每g样本每分钟产生1nmol Fe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR (U/g 鲜重) = (△A-0.0011)÷4.0007×1000×V标÷(V 样÷V 样总×W)÷T = 8.331×(△A-0.0011)÷W
2. 按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每mg蛋白每分钟产生1nmol Fe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。
FCR (U/mg prot) = (△A-0.0011)÷4.0007×1000×V标÷(V 样÷V 样总×W)÷T = 8.331×(△A-0.0011)÷Cpr
注:V 样总:加入提取液体积,1 mL;V 样:反应中样品体积,50μL;V标:加入标准品体积 ,50μL;T:反应时间,30min;W:样品质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;1000,μmol到nmol的转换系数。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

  1. 蛋白定量测定,建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
  2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。