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Cysteine Assay Kit (Microanalysis)

Cysteine Assay Kit (Microanalysis)

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Cysteine Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0063M
别名 半胱氨酸(Cys)含量检测试剂盒(微量法)
蛋白质含有三种含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和 Cys。其中,Cys 是唯一一种含有巯基的含硫氨基酸,从甲硫氨酸转化而来,并且可与胱氨酸互相转化。Cys 参与蛋白质二硫键的形成,经常是蛋白质活性中心的组成部分,还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外,Cys 大量积聚在皮肤和粘膜表面,在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性,并且补充巯基,以维持皮肤的正常代谢,调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,382
4-6日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

Cys 还原磷钨酸生成钨蓝,在 600nm 处有吸收峰;通过 600nm 吸光度,计算 Cys 含量。

Handling Instruction | TargetMol 产品组成

100T/96S规格的产品组成如下:

组成 规格 储存条件
CB0063M-A 50mL×1瓶 4℃保存。
CB0063M-B 15mL×1瓶 4℃保存。
CB0063M-C 粉剂×1瓶 4℃保存。使用前1天,向试剂瓶中加2mL蒸馏水充分溶解,再加磷酸0.5mL,混匀后盖紧(防止水分散失)沸水浴2h;冷却后加8mL蒸馏水,4℃可保存2周有效。
CB0063M-S 标准品×1支 4℃保存;使用前加入4.13mL蒸馏水得到20μmol/mL 标准液,4℃避光可保存一个月。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板 、研钵、磷酸(85%)、冰和蒸馏水。

二、样品处理(半胱氨酸提取):
1.液体样品中半胱氨酸提取:取 0.2mL 液体样品,加CB0063M-A 0.3mL,充分混匀,11000 rpm 4℃离心 10min,取上清液,待测。
2.组织中半胱氨酸提取:称取约 0.2g 组织,加入 0.5mL CB0063M-A 进行冰浴匀浆,11000 rpm 4℃离心 10 min,取上清液待测。

三、测定步骤:
1.(取 1.5mL 离心管,按照下表操作)
2.分光光度计/酶标仪预热 30 min,调节波长到 600 nm,蒸馏水调零。
3.标准液的配制:用蒸馏水稀释为2、1.5、1、0.5、0.25 、0.125μmol/mL 浓度的标准溶液。

试剂名称 空白管 (μL) 标准管 (μL) 测定管 (μL)
蒸馏水 40
标准品(CB0063M-S) 40
上清液 40
CB0063M-B 100 100 100
CB0063M-C 60 60 60
混匀后室温静置 15 min,于 600nm 处测定吸光值。

四、半胱氨酸(Cys)含量计算公式:
1.标准曲线的绘制:
以各标准溶液浓度为 x 轴,以∆A(A 标准管-A 空白管)为 y 轴做标准曲线,得到方程 y=kx+b。将(A 测定管-A 空白管)带入方程求 x 值。

2.半胱氨酸含量计算:
(1)按液体样本的体积计算半胱氨酸含量(μmol/mL)= x×V 样总÷V 样1= 2.5x
(2)按样本质量计算半胱氨酸含量(μmol/g 质量)= x×V 样2÷(W×V 样2÷V 样总)=0.5x÷W
:V 样1:提取体系中加入的样本体积,0.2mL;V 样2:反应体系中加入的样本体积,0.04mL;V 样总:提取体系体积,0.5mL;W:样本质量,g。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。