CSP Assay Kit (Spectrophotometry)

利用带有螯合剂的碱溶液提取共价结合型果胶（CSP），采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应，生成物质在530 nm处有最大吸收峰。

50T/24S规格的产品组成如下：

注：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、水浴锅、可调式移液器、80％乙醇、丙酮、浓硫酸（不允许快递）、研钵和蒸馏水。
二、酶液提取：

1. 细胞壁的提取：取约0.3g样本，加入1mL 80％乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴20min，冷却至室温，4000g 25℃离心10min，弃上清。沉淀加入1.5mL 80％乙醇和丙酮各洗一遍（涡旋振荡2min左右，4000g 25℃离心10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入1mL CB0060S-A（去除淀粉）浸泡15小时，4000g 25℃离心10min，弃上清，将沉淀干燥，称重得细胞壁物质（CWM）。
2. WSP的提取：称取烘干的CWM 3mg，加入1mL CB0060S-B，充分匀浆(若烘干物质质地坚硬，可先研碎后再加入1mL CB0060S-B匀浆，或者用匀浆器匀浆)。8000g 4℃离心10min，取上清液待测。

三、测定步骤：

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至530nm处，蒸馏水调零。
2. CB0060S-C和CB0060S-D 37℃预热10min以上。
3. 操作表（在EP管中依次加入）：

、
注：1. 若A大于2，需将待测样本用蒸馏水稀释（可稀释10倍或20倍）。
2.空白管和标准管只要做一管，每个测定管需设一个对照管。

四、CSP含量计算：
CSP含量(mg /g 干重)
= (C标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) ×稀释倍数
=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀释倍数
注：C标准：标准管浓度，0.05mg/mL；V1：加入样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，1mL；W：样本干重，g。

1. 最低检测限为50μg /g 干重。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。