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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
100 T | ¥ 1,512 | 10-12日内发货 |
CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生丙酮酸,与2,4-二硝基苯肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm下有特征吸收峰。
100T/48S规格的产品组成如下:
组成 | 规格 | 储存条件 |
CB0059M-ES | 100mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0059M-A | 粉剂×1瓶 | 4℃避光保存,临用前加入2mL水溶解,剩余试剂分装后-20℃保存。 |
CB0059M-B | 粉剂×1瓶 | -20℃避光保存,临用前加入10mL水溶解,剩余试剂分装后-20℃保存。 |
CB0059M-C | 15mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0059M-D | 6mL×1瓶 | 4℃避光保存。 |
CB0059M-E | 30mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0059M-Standard | 粉剂×1支 | 临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2µmol/mL,-20℃保存。 |
注:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
酶标仪、96孔板/微量玻璃比色皿、天平、研钵、离心机、恒温水浴锅、蒸馏水。
二、样本处理:
三、测定步骤:
试剂名称 | 对照管 (μL) | 测定管 (μL) | 标准管 (μL) | 空白管 (μL) |
样品 | 50 | 50 | ||
标准溶液 | 50 | |||
CB0059M-A | 25 | 25 | 25 | |
蒸馏水 | 25 | 25 | ||
CB0059M-B | 25 | 25 | 25 | 25 |
充分混匀,37℃反应20min。 | ||||
CB0059M-C | 100 | 100 | 100 | 100 |
CB0059M-D | 50 | 50 | 50 | 50 |
充分混匀,室温反应5min。 | ||||
CB0059M-E | 250 | 250 | 250 | 250 |
充分混匀,静置5min,于1mL玻璃比色皿测定510nm处吸光值,分别记为A 对照管、A 测定管、A 标准管和A 空白管,△A 测定=A 测定-A 对照,ΔA 标准=A 标准管-空白管。每个测定管设一个对照管。 |
四、CSL酶活性计算:
标准曲线的绘制:
以标准溶液浓度为 x 轴(x,nmol/mL),标准溶液对应的 ΔA 标准为 y 轴(y,ΔA 标准),建立标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将 ΔA 测定带入方程得到 x(nmol/mL)。
C-S lyase活性 (nmol/min/mg prot) =x×V 样÷(V 样×Cpr)÷T = x÷ Cpr×0.05
(2)按照样本质量计算:
C-S lyase活性 (nmol/min/g 鲜重) = x×V 样÷(V 样÷V 样总×W )÷T = x÷ W×0.05
注:V 样,加入样本上清体积,0.05mL;V 样总:加入提取液CB0059M-ES体积,1mL;Cpr:蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T,反应时间,20min。
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