CFSE (Cell Proliferation Tracer Fluorescent Probe)

1. 标记性能好，染色后细胞内的荧光信号明亮且均匀。
2. 荧光信号稳定，染色后荧光信号可维持数天。
3. 细胞毒性低，不会干扰细胞增殖等正常生理活动。
4. 结果可靠，荧光染料只会通过细胞分裂转移到子代细胞，不会因为贴近转移到相邻细胞。
5. 操作简便，检测快速。

细胞增殖检测、细胞示踪研究、外泌体摄取示踪、活细胞分化轨迹监测。

用适宜稀释液（无血清培养基或PBS缓冲液）将CFSE储备液稀释成浓度为1-10 µM的CFSE工作液。具体的工作浓度应视实验情况调整。工作液现配现用。

1. 对于贴壁细胞：
   （1）将贴壁细胞接种在无菌细胞爬片上培养。
   （2）待细胞培养完成，吸去旧培养基，用37℃预热的PBS洗涤细胞1次。
   （3）加入37℃预热的CFSE染色工作液，将细胞转移至37℃细胞培养箱避光孵育15 min。
   （4）吸除染色液，加入适量37℃预热的细胞培养基，在37℃细胞培养箱避光孵育30 min。
   （5）吸除旧培养基，加入37℃预热的PBS洗涤细胞1-2次。
   （6）加入37℃预热的细胞培养基覆盖住细胞，在荧光显微镜下观察染色结果。可设置激发波长为492 nm、发射波长为517 nm，来检测荧光。
   注：若需要用流式细胞仪检测贴壁细胞，可先用胰蛋白酶对贴壁细胞进行消化，收集、重悬细胞后参照下述悬浮细胞的染色步骤进行操作。
2. 对于悬浮细胞
   （1）将细胞悬液离心，弃旧培养基，收集细胞沉淀。用37℃预热的PBS洗涤细胞1次。
   （2）加入37℃预热的CFSE染色工作液重悬细胞，转移至37℃细胞培养箱避光孵育15 min，孵育结束后离心、弃上清。
   （3）加入37℃预热的细胞培养基重悬细胞，转移至37℃细胞培养箱避光孵育30 min，孵育结束后离心、弃上清。
   （4）向细胞沉淀中加入37℃预热的PBS重悬细胞，离心，弃上清。
   （5）加入37℃预热的细胞培养基重悬细胞，用荧光显微镜或流式细胞仪检测染色结果。可设置激发波长为492 nm、发射波长为517 nm，来检测荧光。

-20℃避光保存，半年有效。

1. CFSE储备液建议按工作体积配制，不宜一次性配制过多量，配好的储备液建议在1个月内使用完毕。
2. CFSE在水性环境中不稳定，易发生水解，CFSE工作液需现配现用。
3. 光照易导致荧光淬灭，操作过程应注意避光。
4. 由于样本类型和实验环境的不同均会影响染色效率，建议通过预实验来优化工作液浓度和染色时间。
5. 本品仅适用于专业科研用途，严禁用于临床诊断、治疗、食品或药品领域，且不得存放于住宅等非专业场所。
6. 为保障操作安全与人员健康，操作时请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。

• C0162-CFSE (细胞增殖示踪荧光探针)说明书-中文(1.3M MB)