Cell Freezing Medium

• 即用型配方：开瓶即可使用，无需额外配制，显著简化冻存流程。
• 高复苏率：优化的DMSO和保护剂比例，有效减少冰晶形成，提高细胞冻融存活率。
• 广泛适用性：适用于多种哺乳动物细胞，包括贴壁细胞、悬浮细胞、干细胞及原代细胞。
• 细胞状态保持良好：冻融后细胞形态、增殖能力及功能恢复快，实验重复性高。
• 兼容多种冻存条件：可配合程序降温盒、控温冻存仪或手动降温方法使用。

适用于多种哺乳动物细胞的长期低温保存，确保细胞在冻存和复苏后的高存活率与稳定性。

一、细胞冻存步骤
1. 细胞收集
选择生长状态良好、处于对数生长期的细胞。贴壁细胞用胰酶消化后离心收集，悬浮细胞直接离心收集，建议离心条件为1000 rpm，5 min。
2. 细胞重悬
弃去上清液后，加入细胞冻存液轻轻重悬细胞，一般建议每管细胞密度为1×10^6–1×10^7个/mL。
3. 细胞分装
将重悬好的细胞分装入无菌冻存管中，每管约1 mL。
4. 程序降温
将冻存管置于程序降温盒中，以约-1°C/min的速率逐步降温至-80°C，冻存过夜。
5. 长期保存
第二天将冻存管转移至液氮罐（-196°C）中长期保存。

二、细胞复苏步骤
1. 快速融化
从液氮中取出冻存管，立即置于37°C水浴中快速摇动融化，时间控制在1–2 min。
2. 稀释去除冻存液
将融化后的细胞悬液缓慢加入预热的完全培养基中（约 10 mL），边加入边轻轻混匀。
3. 离心去除残液
以1000 rpm离心5 min，弃去上清，重新加入新鲜培养基重悬细胞。
4. 培养恢复
将细胞接种于合适的培养皿或瓶中，置于37°C、5% CO2培养箱中培养。
建议在复苏后24 h更换培养基，以去除残余的冻存液成分。

4℃可保存三个月，-20℃可保存一年。

1. 冻存液应分装保存，避免多次冻融影响成分稳定性和保护效果。
2. 使用前建议将冻存液在4°C预冷，以减少温度变化对细胞的应激。
3. 整个冻存和复苏过程应在无菌条件下进行，防止微生物污染。
4. 冻存前请确保细胞状态良好，处于对数生长期，且存活率不低于90%。
5. 细胞可在液氮中长期保存；若放置于-80°C，可稳定保存约1年。
6. 本品仅适用于专业科研用途，严禁用于临床诊断、治疗、食品或药品领域，且不得存放于住宅等非专业场所。
7. 本产品对皮肤、眼睛和呼吸道有刺激性，为保障操作安全与人员健康，操作时请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。

• C0198-细胞冻存液说明书-中文(1.28 MB)