Amylose Assay Kit (Microanalysis)

Name: Amylose Assay Kit (Microanalysis)
Brand: TargetMol
SKU: CB0024M
Rating: 5 (4 reviews)

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产品编号 CB0024M

别名 直链淀粉含量检测试剂盒（微量法）

直链淀粉（Amylose）是D-葡萄糖基以a-（1,4）糖苷键连接的多糖链，其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。

规格	价格	库存	数量
100 T	¥ 1,404	4-6日内发货

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实验操作小课堂

常见问题解答

检测原理

利用80％乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开，直链淀粉与碘形成的络合物在620nm下有吸收峰。

产品组成

100T/96S规格的产品组成如下：

组成	规格	储存条件
CB0024M-A	100mL×1瓶	4℃保存。
CB0024M-B	100mL×1瓶（乙醚）	自备。
CB0024M-C	110mL×1瓶	4℃保存。
CB0024M-D	2mL×1瓶	4℃保存。
CB0024M-E	1.5mL×1瓶	4℃保存。
CB0024M-Standard	粉剂×1支	4℃保存；临用前加入 0.1mL 无水乙醇和 0.9mL CB0024M-C，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即 10mg/mL 的标准品，4℃保存。

注：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量玻璃比色皿、研钵、冰、乙醚（＞98%，AR）、无水乙醇（＞98%，AR）和蒸馏水。
二、淀粉提取：
称取0.1- 0.2g新鲜样本（建议称取约0.1g新鲜样本）于研钵中研碎，加入1mL CB0024M-A，充分匀浆后转移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入1mL CB0024M-B（乙醚）振荡5min，3000g，25℃离心5min，弃上清，留沉淀，加入1mL CB0024M-C充分溶解，90℃水浴10min，冷却后待测。
三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至620nm，蒸馏水调零。
2.标准液的稀释：将 10 mg/mL 的标准溶液用CB0024M-C稀释至 2、1.6、1.2、0.8、0.4、0.2、0.1 mg/mL 标准溶液待测。
3.样本测定（在96孔板或微量玻璃比色皿中加入下列试剂）：

试剂名称	空白管 (μL)	测定管 (μL)	标准管 (μL)
样本		20
标准溶液			20
CB0024M-C	20
CB0024M-D	14	14	14
蒸馏水	156	156	156
CB0024M-E	10	10	10
充分混匀，测定 620nm 处测定管、标准管、空白管的吸光值，分别记为 A 测定、A 标准和A 空白，计算 ΔA 测定=A 测定-A 空白，ΔA 标准=A 标准-A 空白。

注：标准曲线和空白管只需测定 1-2 次。

四、直链淀粉含量计算：
1.标准曲线的建立
以直链淀粉标准溶液浓度为 x 轴（x，mg/mL），标准溶液对应的 ΔA标准为 y 轴（y，ΔA标准），建立标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将 ΔA测定带入方程得到 x（mg/mL）。
2.直链淀粉含量计算
（1）按照蛋白浓度计算
直链淀粉含量 (mg/mg prot) = x×V样总÷Cpr=x÷Cpr
（2）按样本干重计算
直链淀粉含量 (mg/g干重) =x×V样总÷W=x÷W
V样总：加入CB0024M-C体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。