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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
50 T | ¥ 1,166 | 待询 |
利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。
50T/48S规格的产品组成如下:
组成 | 规格 | 储存条件 |
---|---|---|
CB0023S-A | 50mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0023S-B | 50mL×1瓶(乙醚) | 自备。 |
CB0023S-C | 60mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0023S-D | 4mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0023S-E | 7.5mL×1瓶 | 4℃保存。 |
CB0023S-Standard | 粉剂×1支 | 临用前加入 0.1mL 无水乙醇和 0.9mL CB0023S-C,混匀后沸水浴至溶解,即 10mg/mL 的支链淀粉;4℃保存。 |
一、自备用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、乙醚和蒸馏水。
二、淀粉提取:
称取0.01-0.02g烘干样本(建议称取约0.01g)于研钵中研碎,加入1mL CB0023S-A,充分匀浆后转移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL CB0023S-B(乙醚)振荡5min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL CB0023S-C充分溶解,90℃水浴10min,冷却后待测。
三、测定步骤:
1.分光光度计预热30min以上,蒸馏水调零。
2.标准液的稀释:将 10 mg/mL 的标准溶液用CB0023S-C稀释至 2、1.6、1.2、0.8、0.4、0.2、0.1 mg/mL 标准溶液待测。
3.样本测定(在EP管中加入下列试剂):
试剂名称 | 空白管 (μL) | 测定管 (μL) | 标准管 (μL) |
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样本 | 200 | ||
标准溶液 | 200 | ||
蒸馏水 | 200 | ||
CB0023S-D | 75 | 75 | 75 |
CB0023S-E | 50 | 50 | 50 |
蒸馏水 | 675 | 675 | 675 |
充分混匀,测定 530nm 和 755nm 处的吸光值,530nm 下的测定管、标准管、空白管分别记为 A测定、A标准和A空白,755nm 下的分别记为 A’测定、A’标准、A’空白,计算 ΔA测定=(A测定-A空白)-(A’测定-A’空白),ΔA标准=(A标准-A空白)-(A’标准-A’空白)。 |
四、支链淀粉含量计算:
1.标准曲线的建立
以支链淀粉标准溶液浓度为 x 轴(x,mg/mL),标准溶液对应的 ΔA标准为 y 轴(y,ΔA标准),建立标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将 ΔA测定带入方程得到 x(mg/mL)。
2.支链淀粉含量计算
(1)按照蛋白浓度计算
支链淀粉含量 (mg/mg prot) = x×V样总÷Cpr=x÷Cpr
(2)按样本干重计算
支链淀粉含量 (mg/g干重) =x×V样总÷W=x÷W
V样总:加入CB0023S-C体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。