6PG Assay Kit (Visible Spectrophotometry)

6-磷酸葡萄糖脱氢酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH，NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8显橙黄色，在450 nm下测定吸光值。

50T/24S规格的产品组成如下：

1.自备用品：
分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
2.样品处理:
1)细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：CB0003V-ES体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL CB0003V-ES），超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。
2)组织：按照组织质量（g）：CB0003V-ES体积(mL)为1：5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mLCB0003V-ES），进行冰浴匀浆，8000g，25℃离心10min，取上清待测。
3)血清（浆）等液体样品：直接测定。
3.检测步骤：
1)分光光度计预热30min以上，调节波长至450nm，蒸馏水调零。
2)标准液的稀释：将标准液用蒸馏水稀释为 250、200、150、100、50、25nmol/mL 的标准溶液。
3)CB0003V-B的配制：临用前加入10mL水充分溶解待用，剩余试剂分装后-20℃保存。
4)工作液的配制：临用前按照样本数量，按以下比例配制工作液。

1)标准曲线的绘制
以标准液的浓度（nmol /mL）为 x 轴，对应的 ΔA标准为 y 轴绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将 ΔA测定代入方程中计算得到样本浓度（x，nmol /mL）。
2)6PG含量的计算：
A.按照血清（浆）体积计算
6PG含量 (nmol/mL) = [x×V1]÷V1 = x
B.按照蛋白浓度计算
6PG含量 (nmol/mg prot) = [x×V1]÷(V1×Cpr) = x÷Cpr
C.按照样品质量计算
6PG含量 (nmol/g鲜重)= [x×V1]÷(W ×V1÷V2) = x÷W
D.按照细菌或细胞密度计算
6PG含量 (nmol/10⁴ cell) = [x×V1]÷(500×V1÷V2) = 0.002x
注：V1：加入反应体系中样本体积，0.25mL；V2：加入CB0003V-ES体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。

1.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。