Z-IETD-AFC is a fluorescent substrate for caspase-8 and granzyme B. It can be used to quantify cysteinyl aspartate-8 or granzyme B activity.

使用方法
a.溶液配制：
1.准备 Z-IETD-AFC 粉末，将其溶解在 DMSO 中，配制成 10 mM 的储备液，储存于 - 15℃以下，避光保存。准备 DTT（1 M）、EDTA（100 mM）、Tris 缓冲液（20 mM，pH=7.4）。
2.取 50 μL Z-IETD-AFC 储备液、100 μL DTT、400 μL EDTA、10 mL Tris 缓冲液混合，配制成 2x 的 Caspase 底物检测液，其中 Z-IETD-AFC 的终浓度为 50 μM。
b.操作步骤：
1.样本处理：将含有 Caspase-8 活性的样本或细胞裂解物与等体积的 2x Caspase 底物检测液混合，在室温下孵育至少 1 小时。
2.检测分析：使用荧光酶标仪监测荧光强度，激发波长为 376 nm，发射波长为 482 nm，根据荧光强度的变化来定量 Caspase-8 的活性。