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别名 Dispase II, Dispase
Neutralprotease, Paenibacillus polymyxa (Dispase II, Dispase) 是一种中性蛋白酶,具有效纤连酶和 IV 型胶原酶的活性。此化合物可应用于将完整的表皮与真皮分离,以及从培养物中分离完整的上皮片与基质。
Neutralprotease, Paenibacillus polymyxa (Dispase II, Dispase) 是一种中性蛋白酶,具有效纤连酶和 IV 型胶原酶的活性。此化合物可应用于将完整的表皮与真皮分离,以及从培养物中分离完整的上皮片与基质。
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mg | 待询 | 待询 | |
| 50 mg | 待询 | 待询 |
| 产品描述 | Neutralprotease, Paenibacillus polymyxa (Dispase II, Dispase), is a neutral protease that effectively functions as a fibrinolysin and type IV collagenase. It is utilized to separate intact epidermis from dermis and to detach complete epithelial sheets from the matrix in cultures. |
| 体外活性 | 使用方法:1. 溶液配制:使用DPBS缓冲盐溶液(无钙镁离子)将冻干粉溶解制备10 mg/mL的储存液,并使用0.22 μM滤膜进行除菌过滤。使用时,用DPBS稀释储存液至工作浓度,细胞分离常用工作浓度为0.6-2.4 U/mL。注意:工作浓度不宜超过2.4 U/mL。2. 组织解离:利用无菌刀或剪刀将组织剪成3-4 mm的块状,使用无菌PBS清洗,然后加入Dispase II溶液(0.6-2.4 U/mL)确保完全浸没,并在37℃下孵育,孵育期间轻微搅拌,直到组织解离。对于难以解离的组织,一般1小时即可完全分离,但长时间(如数小时)孵育对细胞活性无明显影响。有需要时,可用无菌不锈钢网筛过滤消化产物,以分离单细胞和残留组织块;或者在大块组织沉淀后轻轻倒出上层细胞,必要时可使用新鲜dispase进一步解离。离心收集细胞并弃去酶溶液,用培养基重悬细胞沉淀,并在常规条件下培养。3. 细胞传代:用37℃预热的Dispase溶液处理细胞,于37℃孵育5分钟后吸除溶液,继续孵育10分钟,观察显微镜下的细胞分离情况,必要时可延长孵育15分钟。用培养基悬浮并清洗细胞,换用新鲜培养液重悬细胞,并按照常规方法铺板。 |
| 别名 | Dispase II, Dispase |
| CAS No. | 42613-33-2 |
| 存储 | Powder: -20°C for 3 years | In solvent: -80°C for 1 year |
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